实验室厌氧培养如何进行(如何解决实验室液体培养基的冲氧问题)
实验室厌氧培养如何进行(如何解决实验室液体培养基的冲氧问题)
在生物学的世界里，微生物实验室扮演着至关重要的角色。这里不仅是微观生命的培育场，也是科学家们探索未知、揭示生命奥秘的战场。一个完善的微生物实验室，犹如一座精密的钟表，每个部件——从超净工作台的无菌保障，到培养箱内的生命温床，再到生物安全柜的防护屏障——都不可或缺。这些仪器不仅支撑着实验的顺利进行，更是研究人员的得力助手。
微生物实验室仪器摆放要注意什么
微生物实验室是生物学领域必备实验室。如何配置才能成就一个完备的微生物实验室，哪些仪器必不可少，哪些仪器可有可无？
超净工作台
微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养，那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。超净工作台的用途是微生物的接种及处理时的无菌操作。
培养箱
培养箱有多种类型，它的作用在于为微生物的生长提供一个适宜的环境。培养箱有多种类型，包括生化培养箱，霉菌培养箱，厌氧培养箱等。具体来说区别如下：
- 生化培养箱只能控制温度。可作为一般细菌的平板培养。
- 霉菌培养箱可以控制温度和湿度。可作为霉菌的培养。
- CO2培养箱适用于厌氧微生物的培养，例如双歧杆菌。
天平
天平用于精确称量各类试剂。实验室常用的是电子天平，电子天平按照精度不同有不同的级别。
微生物均质器
用于从固体样品中提取细菌。用微生物均质器制备微生物检测样本具有样品无污染、无损伤、不升温、不需要灭菌处理，不需洗刷器皿等特点，是微生物实验中使用较为方便的仪器。
菌落计数器
菌落计数仪可协助操作者计数菌落数量。通过放大，拍照，计数等方式准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可连接电脑完成自动计数的操作。
微波炉/电炉
用于溶液的快速加热，微生物固体培养基的加热溶化。
高压灭菌锅
微生物学所用到的大部分实验物品、试剂、培养基都应严格消毒灭菌。灭菌锅也有不同大小型号，有些是手动的，有些是全自动的。用户需要根据自己的需要选购。
移液器
液体量器用于精密量取各类液体。常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯。
冰箱
冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存，有些要求是负20度保存，实验人员一定要看清试剂的保存条件，放置在恰当的温度下保存。具体来说，不同温度下保存的物品如下：
- 4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。
- -20℃适用于某些试剂、药品、配好的抗生素等。
- -80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、感受态等的保存。
生物安全柜
微生物实验中涉及的试剂和样品微生物有些是有毒的，对于操作人员来说伤害较大。为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散，可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护。
摇床
摇床是实验室常用的一种仪器，在微生物实验操作过程中，液体培养基培养细菌时需要在特定温度下振荡使用。
纯水装置
纯水装置包括蒸馏水器和纯水机。蒸馏水器的价格便宜，但在造水过程中需要有人值守；纯水机价格高些，但是使用方便，可以储存一定量的纯水。纯水使用也有不同的级别，实验中配制试剂，配制培养基均需用纯水。
生物显微镜
由于微生物体积较小，所以在观察时需要借助生物显微镜。生物显微镜用于微生物和微小物品结构，形态等的观察。
冷冻干燥机
主要适用于细菌、微生物、酵母等的干燥。用于干燥保存易脱水的产品，在加水以后能够再次恢复原材料的特性，不影响其生物活性等。通过冷冻干燥，细菌之类的材料成为干燥状态，从而不会发生化学改变。
分光光度计
分光光度计在微生物试验中用于测定微生物悬液的浓度，可以正确选取合适的培养时间。一般是在600nm波长测定菌液浓度。
恒温干燥箱
恒温干燥箱是用于灭菌和洗涤后的物品烘干。烘箱有不同的控温范围，用户可以根据实验需求进行选择。例如，有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干，一般玻璃用具的烘干可以选择60℃。
恒温水浴锅
水浴锅是一种控温装置，水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分。有些微生物反应需要在37度，42度，56度下水浴进行，所以恒温水浴锅可以提供需要的温度。
酸度计
用于配置试剂时精确测量PH值，从而保证配置的溶液的精确性。有时也需要利用pH计测定样品溶液的酸碱度。
离心机
用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。离心机有冷冻和常温之分。有些样品由于在常温下不太稳定，需要低温环境，要视样品的种类而定。
液氮罐
液氮罐储存液氮，可用于细菌、酵母、霉菌和大型真菌等各种微生物的长期保存。以上介绍的是微生物实验室的基本仪器配置，在组建实验室时还需要其他一些耗材，例如酒精灯，试管架，三角瓶，量筒，玻璃试管，灭菌吸管，凉干架，剪刀，镊子，脱脂棉，纱布，试管筐，无菌采样及称样袋，接种环，过滤器等。实验人员可以根据自己的需求为微生物实验室配置合适的仪器和耗材。
微生物实验室管理制度
实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理、使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。
如何解决实验室液体培养基的冲氧问题
一种液体培养基的除氧方法，其特征是按如下步骤进行：
- 制备刃天青水溶液作为厌氧指示剂，所述厌氧指示剂在有溶氧状态下呈深蓝色或浅蓝色、微溶氧状态下呈粉红色、无溶氧状态下显无色；
- 将L-半胱氨酸盐酸盐、生物缓冲剂MES与S1所得厌氧指示剂添加到装有1L液体培养基的厌氧瓶中并混匀；
- 向S2的厌氧瓶底部通入50-100min的氮气，预处理液体培养基中的部分溶解氧，使中海液体培养基颜色由深蓝色变为浅蓝色或浅粉红色；
- 静置已去除部分溶解氧的液体培养基，通过S2中添加的L-半胱氨酸盐酸盐消耗厌氧瓶内余下的溶解氧，使液体培养基颜色由浅蓝色或浅粉红色变为无色，即完成除氧。
生物实验室的细菌培养废液如何进行处理
实验室的细菌培养废液可以用微生物法进行处理，利用微生物处理污水就是通过微生物的代谢活动来分解污水中的有机物，从而达到净化污水的目的。微生物可以从污水中吸收糖、蛋白质、脂肪、淀粉和其他低分子化合物。微生物代谢有两种类型：好氧和厌氧。因此，处理方法分为好氧净化和厌氧净化。也可以采用相关的艾柯污水处理设备实现污水的一体化处理。
在好氧净化氧条件下，许多需氧微生物通过分解代谢、合成代谢和物质矿化，将有机物氧化分解为CO2和H2O，从而获得C、N、P、S和能量。污水微生物好氧净化是模拟上述原理，将微生物置于一定的结构中进行曝气培养，高效净化污水的一种方法。
在厌氧条件下，大部分有机物在厌氧净化微生物的发酵或消化过程中分解为H2、CO2、H2S、CH4等气体。污水生物厌氧净化是基于污水经厌氧发酵后得到净化，获得生物能量CH4的原理。
