通过Y-迷宫实验,如何来评估动物的学习记忆成绩?
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通过Y-迷宫实验,如何来评估动物的学习记忆成绩?
引用
澎湃
1.
https://m.thepaper.cn/newsDetail_forward_28206972
Y-迷宫实验是评估动物学习记忆能力的经典方法之一,通过灯光和电刺激建立条件反射,观察动物的空间辨别和记忆能力。这种方法在神经科学、心理学和药理学等领域有着广泛的应用。本文将详细介绍Y-迷宫实验的原理、操作步骤和评估指标,帮助读者全面了解这一实验技术。
实验目的
- 了解Y-迷宫实验的原理。
- 掌握Y-迷宫实验方法。
- 观察实验动物建立条件反射过程中的学习、记忆能力。
实验原理
通过灯光和电刺激,使动物形成回避条件反射,观察和记录动物的回避条件反应能力和空间辨别能力。分析和推断动物的学习、记忆和空间认知等方面的能力。
实验动物
大鼠、小鼠。
实验软件
SuperMaze动物行为分析软件,VisuTrack动物高端行为分析软件,上海欣软信息科技有限公司。
实验器材
Y-迷宫由三等分辐射式迷路箱和控制仪组成。三等分辐射式迷路箱由等长的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ臂和三者的交界区组成。箱底铺设直径0.2cm,长14cm,间距lcm 的电栅。每臂长45cm,顶端各装一盏15W 的刺激信号灯。
Y迷宫,型号:XR-XY1032,上海欣软
Y-迷宫的控制仪有电压控制按钮、延时控制按钮、自动控制按钮和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 、0四个按钮,当分别按下I、Ⅱ、Ⅲ按钮时,相应臂的信号灯亮,此时该臂不通电为安全区(红灯区),另外无灯光的两臂及交界区均通电而成为非安全区(电击区)。按下0按钮,则三臂均不通电,但交界区通电。信号灯亮后,稍停片刻电栅才开始通电,这一短暂的间歇期由延时控制按钮调节。也可按自动控制按钮,使灯光和通电由控制仪自动控制。
实验方法与步骤
- 筛(预)选
- 将大鼠放入Y-迷宫箱中适应3~5min后,给予适当电击至其对3臂均探索进入为止。选择活跃,对电击反应较敏感,逃避反应迅速者供测试用。淘汰反应过于迟钝或特别敏感的大鼠。
- 预选出达到电击次数≤3次时连续2次正确反应的动物,即对电击反应较敏感的大鼠供实验用。
- 在上述初步筛选的基础上,通过正式迷宫训练,淘汰达不到学会标准(学不会)的大鼠。
- 正误判定的标准
- 大鼠受电击后从起步区直接逃到安全区或通电后10s内一次性跑向安全区为“正确反应”,若逃到无灯光的任何另一臂,则记为错误反应。
- 达标(学会)标准
- 连续10次中有9次或以上正确反应(正确反应率≥90%)定为学会标准。
- 每个实验日进行20次训练测试,错误反应次数(errors number EN)≤2次。全天总反应时间(total reaction time TRT)≤120s作为判定大鼠学会的标准。因为EN反映大鼠反应的正确程度,TRT反映大鼠反应时间的长短,可综合评价大鼠的学习记忆能力,因而此标准更为合理。
- 以上为每只大鼠达标(学会)标准,全组大鼠达标(学会)标准为全组正确率(学会动物数/该组动物总数×100%)达85% 以上。
- 学习测试
- 实验时先将大鼠放入迷宫中适应3~5min,然后再开始正式实验。
- 随机休息法:安全区以无规则次序变换,以训练大鼠辨别灯光刺激及安全方位的能力,大鼠受电击后逃到安全区后,灯光继续作用10~15s,熄灯后结束一次测试,大鼠所在支臂就作为下一次测试的起点,两次测试时间间隔为30s或休息1min 后再予以第2次测试,依次重复,测试至达连续9/10标准。
- 随机不休息法:安全区以无规则的次序变换开始时,对大白鼠所在支臂与另一支臂通电,动物在电击下逃窜至灯光区后再保持l0s或30s为一次测试。然后动物所在支臂为下次测试的起始位置进行下一次测试。
- 顺序法:三臂末端按Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅰ臂轮流作为起步区或安全区。
- 以上方法还可以分为两类:①每天固定训练次数,一般是20次,连续训练3~4d。大鼠一般都能达到学会标准。②不固定训练次数,采用分段连续训练法,即每训练10次,休息1min,连续训练直到学会为止,训练在1d内完成。一般多采用第一种方法。
- 记忆保持(再现)测试
- 学习测试24h、48h、1周、30d后,再以同样方法测试至9/10标准,正确反应次数定为A,以A/10表示记忆的保持能力,此值越高说明记忆力越好。
观察指标
- 达标所需的训练次数(电击次数、反应次数、测试次数):用动物学习达到学会标准前所需的测试数,表示其空间分辩反应的学习记忆成绩。
- 达标所需的天(日)数:记录每只大鼠达到学会标准所用的日数。
- 错误反应次数(errors number EN ):一个实验日完成所有反应中错误反应的次数。
- 全天总反应时间(total reaction time TRT):动物的反应时(潜伏期)指从信号灯亮开始至大鼠第1次逃至灯亮区为止所耗的时间,全天总反应时是一个实验日(全天)完成所有反应(包括正确反应和错误反应)所需时间。
- 主动回避率:大鼠在灯亮后但未通电的5s内完成逃避反应的次数占总反应次数的百分率。安全区灯亮,电刺激尚未开始时,大鼠即逃往安全区表明大鼠已经形成了明暗辨别条件反射(主动回避反应)。
- 正确反应率(行为正确率):正确反应数占总测试数的百分比。
- 全组正确率:学会动物数占该组动物总数的百分比。
- 3d学会率:训练第3d达学会标准的动物数占该组动物总数的百分比。
注意事项
- 严格筛选动物,淘汰对电击耐受性差或对电击不敏感的动物。
- 操作规范,尽量由专人操作,减少误差。
- 实验环境安静,光线适宜。尽量在每天相同时间进行实验。
- 刺激的电压强度一般为30~70V,延时为3~5s,电栅的导电性能要稳定,随时清理动物粪便,防止电栅短路。
评价
简单易行,观察指标多。但动物的反应差异性较大,要注意实验动物的筛选。动物粪便容易使电栅短路,若未及时发现就会造成实验误差。
本文原文来自澎湃新闻
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