实验动物采血方法详解：尾尖采血、眼眶静脉丛采血等的介绍及应用场景

实验动物采血方法详解：尾尖采血、眼眶静脉丛采血等的介绍及应用场景

实验动物采血是一项基本的实验技能，掌握正确的采血方法对于确保实验数据的准确性和动物福利至关重要。本文将系统介绍小鼠和大鼠的几种常见采血方式，包括尾尖采血、眼眶静脉丛采血、颌下静脉采血、隐静脉采血和心脏采血，并详细说明每种方法的操作步骤、注意事项及适用场景。

在进行采血操作之前，了解一些基本的采血原则是非常重要的。例如，单次采血量和采血间隔需要根据动物的循环血量来确定。以25g的成年小鼠为例，其循环血量约为1.8ml，而250g的成年大鼠循环血量约为16ml。

表1. 大小鼠的循环血量

研究表明，采集10%的循环血量后，动物需要大约2周时间才能恢复。因此，建议状况良好的小鼠单次采血量不超过循环血量的10%，以避免因失血过多导致休克。以下表格列出了不同采血量对应的恢复期：

表3. 大小鼠采血量及恢复期

如果需要多次采血，建议每周最大采血量不超过循环血量的7.5%，每两周不超过10%。

尾尖采血

尾尖采血是一种常用的采血方法，适用于需要少量血液的连续监测实验。具体操作步骤如下：

1. 麻醉小鼠后，用温水擦拭尾巴以引起轻微的血管扩张（注意水温不要过高）。
2. 使用无菌手术刀或锋利的剪刀，快速截断小鼠尾尖0.5-1cm。如果需要多次采血，之后每次仅需截除2-3mm。
3. 可以从尾部向尾尖方向按摩以增加血流，但这样会降低血样质量并增加溶血风险。
4. 使用毛细采血管收集血液，或直接滴入收集管中。
5. 采血结束后，按压伤口或使用止血剂（如硝酸银）来止血。

每次采血量大约可达0.1ml。这种方法适用于血糖或血常规的动态检测等需要少量血液的实验。

眼眶静脉丛采血

眼眶静脉丛采血适用于需要中等量血液且避免动物死亡的实验。具体操作步骤如下：

1. 小鼠经气体麻醉后，左手拇指及食指压迫小鼠的颈部两侧，使眼球突出，眼眶后静脉丛充血。也可以将小鼠放置在侧卧位，拇指与食指分别置于小鼠头顶和下颌，将皮肤向后及向下拉。
2. 抓握时要避免对气管施压，否则可能会影响小鼠呼吸。
3. 将毛细采血管置于内侧眼角处，并以与鼻翼平面成30-45度角刺入。
4. 在轻轻旋转采血管的同时施加压力，血液将通过毛细作用流入采血管。
5. 不能刺地过深，一般2-3mm即可。
6. 采血结束后，立即松开手指对小鼠的压迫，使眼球复位，同时将采血器拔出。
7. 可用干棉球压住眼眶，确保止血。

一般眼眶静脉丛采血量可以达到0.2-0.3ml。

颌下静脉采血

颌下静脉采血是一种无需麻醉的采血方法，适用于需要少量血液的连续监测实验。具体操作步骤如下：

1. 保定小鼠，可将小鼠侧卧，使小鼠头部尽量固定。
2. 在小鼠嘴角沿线与外眼角线橡胶处找到颌下静脉的大致位置，会发现一个无毛的小点，有点像酒窝。基本位于嘴角远端稍低于下巴线。
3. 针保持垂直于皮肤表面，刺入皮肤。深度不超过针头的斜面。
4. 拔出针头后，血液就会流出。为方便采血，可使小鼠头部低于心脏高度。
5. 可以直接使血液滴入采集管，也可以使用毛细采血管。
6. 采血结束后，按压以止血。

一般采血量为0.2-0.5ml。

隐静脉采血

隐静脉采血也是一种无需麻醉的采血方法，适用于需要少量血液的连续监测实验。具体操作步骤如下：

1. 将小鼠置于固定管或架中，但保持后腿可自由活动，剃除跗部的毛。
2. 为使膝盖与踝关节之间的隐静脉更加明显，可以在后腿膝盖以上使用止血带。在近尾侧的皮肤表面可以找到隐静脉。
3. 针垂直于皮肤表面扎破血管。不要进针过深，以免刺穿肌肉或碰到骨头。
4. 血液会从入针处慢慢流出，用毛细采血管收集，并松开止血带。
5. 采血结束后，按压伤口或使用止血剂（如硝酸银）以止血，并将小鼠放回笼内。

一般采血量为0.2-0.5ml。

心脏采血

心脏采血适用于需要大量血液的实验，通常用于实验终末期的采血。具体操作方法有三种：

1. 托起小鼠躯干使身体垂直与地面。身体直立以防止心脏的偏转或胸部的扭曲。使用1毫升注射器和22g针头。将针头从胸部中央向下5mm处插入，深度5-10mm，将注射器与胸部保持25-30度。
2. 使小鼠仰卧，通过胸骨垂直插入针头。
3. 使小鼠侧卧，垂直于胸壁插入针头。

如果血液没有立刻进入注射器，可以轻轻抽空针管，产生一个真空区。当注射器中出现血液时，将针管保持静止并轻轻地抽拉活塞芯杆，以获得更多地血液。一般可以采到0.8-1.0ml血液。

采血方式选择指南

不同采血方式各有优缺点，选择时需要根据实验需求和动物状况综合考虑。以下表格总结了各种采血方式的特点：

表2. 大小鼠建议最大采血量

表3. 大小鼠采血量及恢复期

图1. 眼眶静脉丛采血示意图

表4. 不同采血方式的特点概况

实验动物采血是一项基本的实验技能，掌握正确的采血方法对于确保实验数据的准确性和动物福利至关重要。本文系统介绍了小鼠和大鼠的几种常见采血方式，包括尾尖采血、眼眶静脉丛采血、颌下静脉采血、隐静脉采血和心脏采血，并详细说明了每种方法的操作步骤、注意事项及适用场景。希望这些信息能帮助科研人员更好地开展实验工作。

本文原文来自bio-equip.com