云南越桔的组织培养技术研究

云南越桔的组织培养技术研究

云南越桔是一种具有重要经济价值的植物资源，其果实富含花青素，具有很高的营养价值和保健功效。本文详细介绍了云南越桔的组织培养技术，包括无菌材料的获得、丛生芽的诱导和增殖以及生根与移栽等关键步骤，为该物种的种质资源保存和开发利用提供了技术支持。

植物名称

云南越桔[Vaccinium duclouxii (Lévl.)Hand.-Mazz.]

材料类别

腋芽

培养条件

基本培养基为改良的WPM培养基：以水合硝酸钙[Ca(NO3)2·4H2O] 684 mg·L-1(单位同下)、KNO3190、C10H13FeN2NaO874.3和盐酸硫胺素0.1代替原WPM培养基中的K2SO4、CaCl2、FeSO4和乙二胺四乙酸钠(Na2EDTA)。

诱导芽萌发及分化培养基：(1) WPM+ZT 0.5；

丛生芽的诱导和增殖培养基：(2) WPM+ZT 2.0；

生根培养基：(3) 1/2WPM+NAA 0.05。

以上培养基均附加2.0%蔗糖、6 g·L-1琼脂，pH 5.8。培养温度(23±2)℃，光照12 h·d-1，光照强度40~50μmol·m-2·s-1。

生长与分化情况

无菌材料的获得

以当年生休眠枝条的腋芽为外植体，将外植体置于烧杯中，用自来水冲冼30min，再用洗衣粉液清洗5 min，在超净工作台上用75%酒精浸泡30 s，无菌水冲洗2次，0.1%HgCl2消毒8 min，无菌水冲洗5次，吸干水分。剥去芽鳞，切去基部的受损组织，接种于诱导芽萌发的培养基(1)中。2周后开始萌发；5周后芽长成45cm左右的新梢，侧芽同时也萌发出24个不定芽。

丛生芽的诱导和增殖

不定芽形成后，不切割转接于培养基(2)上。经过4周培养，在不定芽基部长出许多小的不定芽，形成不定芽丛。把丛生芽分割成2~3个为一丛的芽丛，转接到培养基(2)中进行继代培养，6周左右可继代增殖1次。

生根与移栽

取继代培养的芽苗转接于培养基(3)中，5周后基部可长出24条11.5cm长的不定根，生根率78%。培养2~3周，打开瓶盖，炼苗3 d，然后从培养瓶中取出，洗去根部培养基，移入蛭石和腐殖土(1:2)混合的基质中，保湿遮阴，成活率可达90%以上。

意义与进展

云南越桔属杜鹃花科越桔属植物，为多年生落叶或常绿灌木或小灌木树种，与现在人工栽培的蓝莓是同科同属的植物。越桔是一种新兴的保健水果，在医药、化妆、食用色素和食品加工等方面有广泛用途。越桔果实深蓝色，抗氧化能力名列果蔬之首，对防止人体细胞衰老、预防老年性疾病如心脏病、白内障、癌症、记忆力衰退具有特殊的功效，因而被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一。果实所含的花青素是迄今已被利用的最佳天然色素，加工稳定性高，色泽呈深红、紫红或蓝紫，作为药物或高级化妆品的原料均具有十分广阔的前景。近几年，其鲜果和加工品风靡欧美等发达国家，虽然价格昂贵但仍供不应求。北美地区的产量已远不能满足本地和国际市场的需求，为此荷兰、加拿大、澳大利亚、日本、智利等国家先后引种栽培，现已初具商品产量。我国具有丰富的越桔植物资源，特别是云南分布的种类约占全国的一半。云南越桔是西南地区特有种，仅分布于云南和四川。采用组织培养技术，对保存我国的越桔种质资源和开发利用可能有一定的应用价值。