革兰氏染色法：细菌学中的重要鉴别技术
革兰氏染色法：细菌学中的重要鉴别技术
革兰氏染色法是细菌学中一种重要的鉴别染色技术，通过特定的染色步骤将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类。这种方法不仅有助于细菌的形态观察，还能为疾病的诊断和抗生素的选择提供重要参考。
1、革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立。
2、未经染色之细菌，由于其与周围环境折光率差别甚小，故在显微镜下极难观察。
3、染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。
4、革兰氏染色属复染法，即将标本固定后，先用结晶紫染色1分钟后水洗，然后加革兰碘液媒染一分钟后用酒精脱色，再用稀释石炭酸复红复染。
5、染色后除可以看到细菌形态外，还可将细菌分为两大类，即不被酒精脱色而保留紫色者为革兰氏阳性菌（G﹢）。
6、被酒精脱色复染成红色者为革兰氏阴性菌（Gˉ）。
7、革兰氏染色原理尚不肯定，可能与细菌所带核糖核酸、细菌壁结构通透性、等电点等因素有关。
8、致病菌如金黄色葡萄球菌、绿色溶血性链球菌、肺炎球菌、白喉杆菌、炭疽杆菌等属革兰氏染色阳性菌。
9、百日咳杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、流行性脑膜炎双球菌、淋病双球菌等均属革兰氏阴性。
10、所以根据细菌的革兰氏染色性质，可以缩小鉴定范围，有利于进一步分离鉴定，以对疾病做出诊断。
11、又由于各种抗生素的抗菌谱不同，革兰氏染色尚可做为选用抗生素的参考。
12、革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1）涂片固定。
13、2）草酸铵结晶紫染1分钟。
14、3）自来水冲洗。
15、4）加碘液覆盖涂面染1分钟。
16、5）水洗，用吸水纸吸去水分。
17、6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分。
18、7）蕃红梁色液（稀）染10秒钟后，自来水冲洗。
19、干燥，镜检。
20、染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。