PCR仪的种类、选购要点及保养指南
PCR仪的种类、选购要点及保养指南
PCR仪(聚合酶链式反应仪)是分子生物学实验室中不可或缺的设备之一,广泛应用于基因扩增、疾病诊断、法医鉴定等领域。面对市场上琳琅满目的PCR仪产品,如何选择适合自己的仪器?本文将为您详细介绍PCR仪的种类、选购要点以及日常保养方法。
如何选择适合的PCR仪?
选购PCR仪时,需要综合考虑多个因素:
基本需求:首先要明确实验所需的样本管种类(如0.2ml或0.5ml)和样本容量。对于大多数实验室来说,0.2ml的PCR管更为常用。
功能性:包括温度梯度功能、可调热盖功能、计算控温与模块控温、断电保护功能等。这些功能能够显著提高实验效率和结果的准确性。
价格与成本:除了仪器本身的购买价格,还需要考虑维修成本、使用寿命、电源可靠性等因素。建议综合考虑长期使用成本,而不仅仅是短期支出。
性能指标:温度的准确性与精确性、升降温速率等也是重要考量因素。虽然这些指标与价格密切相关,但过分追求高性能并不一定划算。
售后服务:厂家或代理商的售后服务承诺及服务能力同样关键,包括保养服务、元件级维修能力等。
常见PCR仪分类
根据不同的应用场景和技术特点,PCR仪主要分为以下几类:
普通PCR仪
普通PCR仪只能运行一个特定退火温度的程序,适用于简单的基因扩增实验。主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等领域。
梯度PCR仪
梯度PCR仪可以在一次扩增中设置多个不同的退火温度,适合研究未知DNA的退火温度。真正的梯度控制技术目前只有美国ABI公司能够实现,其他品牌多采用热传递方式控制温度。
实时荧光定量PCR仪
实时荧光定量PCR仪在普通PCR仪的基础上增加了荧光信号采集和计算机分析系统,能够实时监测和量化PCR产物。根据检测通道数量,可分为单通道、双通道和多通道。主要用于临床医学检测、生物医药研发、食品行业、科研院校等。
原位PCR仪
原位PCR仪能够在保持细胞或组织完整性的前提下,对细胞内的靶DNA进行定位分析。这种仪器对于研究病原基因在细胞中的位置或目的基因的作用机制非常有用。
PCR仪的主要考虑因素
样本管种类:目前主流的是0.2ml PCR管,0.5ml的使用较少。
样本容量:常见的有96孔、48孔、60孔等规格。
温度梯度功能:对于经常进行不同基因扩增的研究人员来说非常重要。
控温方式:计算控温(管式控温)是目前主流的控温方式,需要输入反应液体积。
断电保护功能:对于经常需要长时间运行的PCR仪来说非常重要。
热盖功能:可调式热盖更为灵活,可以避免因用力不当导致的问题。
软件功能:虽然各品牌差异不大,但显示屏大小和温度变化曲线显示等功能会影响使用体验。
使用寿命:主要取决于半导体制冷片的寿命。
电源可靠性:需要考虑防尘、防潮措施,以延长仪器寿命。
维修成本与保修时间:进口仪器的维修成本通常较高,建议选择提供元件级维修服务的品牌。
温度的准确性与精确性:加热模块中心区域的温度控制效果最佳。
升降温速率:虽然这是一个重要的参数,但过度追求高速率可能弊大于利。
PCR仪的保养与注意事项
PCR仪需要定期维护,以保持其最佳工作状态:
样品池清洗:使用95%乙醇或10%清洗液浸泡后,用棉签吸干剩余液体,然后在50℃下运行PCR程序,使残余液体挥发。
热盖清洗:对于荧光定量PCR仪,当出现荧光污染时,需要清洁热盖底部,确保样品池孔干净,无污物阻挡光路。
外表面清洗:使用无腐蚀性的清洗剂清洁仪器外表面,但注意这不能达到消毒效果。
保险丝更换:定期检查并更换保险丝,确保仪器正常运行。
维护保养注意事项
定期检测:根据制冷方式的不同,建议每半年至少检测一次。
温度校正:当检测发现各孔平均温度差偏离设置温度大于1-2℃时,可以运用温度修正法纠正。
制冷系统检查:当降温过程超过60秒时,需要检查制冷系统,清理灰尘或检查相关部件。
专业维修:除非必要,不要轻易打开或调整仪器的电子控制部件,必要时请专业人员进行维修。
PCR仪作为分子生物学实验的关键设备,其正确选择和维护对于实验结果的准确性和可靠性至关重要。希望本文能帮助您更好地了解PCR仪的相关知识,为您的实验提供有力支持。
文章来源:中国化工仪器网