液相色谱分析中等度和梯度的区别?
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液相色谱分析中等度和梯度的区别?
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在液相色谱分析洗脱过程中,主要分为等度洗脱和梯度洗脱两种方式。
等度洗脱
等度洗脱是指流动相的组成在整个分析过程中保持不变。这种洗脱方式通常适用于单一组分或简单组分混合物的分离,如药物主成分含量测定。
优点
- 流速不发生变化,压力稳定
- 实验结果准确、可靠
缺点
- 多组分检测或有杂质干扰情况下分离度可能会差
- 不容易优化
- 对于某些复杂样品分析时间长
- 峰形差
梯度洗脱
梯度洗脱是指流动相的比例随时间变化。这种洗脱方式通常适用于复杂组分混合物的分离,如药物杂质分析。
优点
- 多组分检测或有杂质干扰情况下提高分离能力
- 缩短某些复杂样品的分析时间
- 改善峰形,减少拖尾
- 提高柱效,增加检测灵敏度
缺点
- 梯度洗脱方法运行后都需要重新平衡液相色谱柱,耗时较长
- 由于不同的液相色谱仪存在不同的体积滞后,所以梯度洗脱方法在不同仪器间转移时可能会出现分离结果的差异
- 流速变化得由程序控制,有时会出错
- 压力可能会不稳定
- 混合时可能会产生气泡,影响基线噪声及漂移
- 高压混合时可能会产生热量
- 对混合器要求很高,如果混合不好,基线噪声和漂移会很大
- 由于流动相比例发生变化,基线可能会漂移
- 实验准确度、稳定性没有等度高
- 故障率高于等度
本文原文来自chem17.com
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