土壤有效磷的测定方法详解：NH4F—HCl法与HCl—H2SO4法

土壤有效磷的测定方法详解：NH4F—HCl法与HCl—H2SO4法

土壤有效磷的测定是土壤农化分析中的重要环节，对于评估土壤肥力、指导农业生产具有重要意义。本文将详细介绍两种适用于酸性土壤的有效磷测定方法：NH4F—HCl法和HCl—H2SO4法。

NH4F—HCl法

方法原理

NH4F—HCl法主要提取酸溶性磷和吸附性磷，包括大部分磷酸钙和一部分磷酸铝和磷酸铁。因为在酸性溶液中，氟离子能与三价铝离子和铁离子形成络合物，促使磷酸铝和磷酸铁的溶解。溶液中磷与钼酸铵作用生成磷钼杂多酸，在一定酸度下被SnCl2还原成磷钼蓝，蓝色深浅与磷的浓度成正比。

试剂

1. 0.5mol/L盐酸溶液。20.2mL浓盐酸用蒸馏水稀释至500mL。
2. 1mol/L氟化铵溶液。溶解37g NH4F于水中，稀释至1L，贮存在塑料瓶中。
3. 浸提液。分别吸取1.0mol/L NH4F溶液15mL和0.5mol/L HCl溶液25mL，加入到460mL蒸馏水中，此即0.03mol/L NH4F一0.025mol/L HCl溶液。
4. 钼酸铵试剂。溶解15g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]于350mL蒸馏水中，缓缓加入350mL的10mol/L HCl溶液，并搅动，冷却后，加水稀释至1L，贮于棕色瓶中。
5. 25g/L氯化亚锡甘油溶液。溶解2.5g SnCl2·H2O于10mL浓盐酸中，待SnCl2全部溶解溶液透明后，再加化学纯甘油90mL，混匀，贮存于棕色瓶中(注1)。
6. 磷标准贮存溶液。准确称取0.2195g在105℃烘箱中烘干的KH2PO4(分析纯)，溶解在400mL水中，加5mL浓H2SO4(防长霉菌，可使溶液长期保存)，转入1L容量瓶中，定容。此溶液为50μg/mL的P标准贮存溶液，可长期保存。
7. 磷标准溶液。吸取50μg/mL P溶液50mL于250mL容量瓶中，加水稀释定容，即得10μg/mL P标准溶液。

操作步骤

称1.000g土样，放入20mL试管中，从滴定管中加人浸提液7mL。试管加塞后，摇动1min，用无磷干滤纸过滤。如果滤液不清、可将滤液倒回滤纸上再过滤，吸取滤液2mL(注2)，加蒸馏水6mL和钼酸铵试剂2mL，混匀后，加氯化亚锡甘油溶液1滴，再混匀。在5~15min内(注3)在分光光度计上用700nm波长进行比色(注4)。

标准曲线的绘制：分别准确吸取10μg/mL P 标准溶液2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、和 25.0mL，放入50mL容量瓶中，加水至刻度定容，配成0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0μg/mL P的系列标准溶液。分别吸取系列标准溶液各2mL，加水6mL和钼试剂2mL再加1滴氯化亚锡甘油溶液进行显色，绘制标准曲线。

结果计算

略

注释

1. 氯化亚锡甘油溶液远比水溶液稳定，可贮存半年以上。但每隔1~2个月，仍应用标准磷溶液检查一下，以视其是否失效。
2. 加入钼酸铵试剂要准确，因为这里显色液体积较小（10mL），钼酸铵试剂量的多少，容易改变溶液的酸度，影响显色。
3. 用氯化亚锡还原剂的钼蓝法，颜色不够稳定，5~15min内颜色最为稳定，比色应该在此时间内进行。
4. 在显色过程中氟化物可能产生干扰影响，可以加硼酸克服，但大多数情况下（除少数酸性砂土）没有必要。

HCl—H2SO4法

方法原理

本法特别适用于固定磷较强的酸性土壤。如土壤有机质含量较低，pH小于6.5，阳离子交换量小于100cmol/kg的土壤。本法不仅适用于酸性土壤有效磷的测定，也能用以测定其他有效养分。

试剂

1. 提取剂〔(0.05mol/LHCl—0.025mol/L(1/2H2SO4)]。精确量取4mL浓HCl 和0.7mL浓 H2SO4 ，放入1L容量瓶中，加水定容。
2. 抗坏血酸溶液。溶解176.0g抗坏血酸于水中，最后加水至2L。贮于棕色瓶中，最好保存在冰箱中。
3. 硫酸-钼酸铵溶液。溶解100g 钼酸铵〔(NH4)6Mo7O24·4H2O]于500mL水中。再溶解2.425g酒石酸氧锑钾〔K(SbO)C4H4O6·1/2H2O] 于钼酸铵溶液中，然后徐徐加入1400mL浓H2SO4，充分混匀，冷却后加水至2L，贮于塑料瓶中，放在暗处。
4. 工作溶液。工作溶液需要现配现用，即吸取抗坏血酸溶液10mL和硫酸一钼酸铵溶液20mL，用提取剂稀释至1L。工作溶液配好后放置2h后再使用。
5. 磷标准溶液(1000μg/mL P)。溶解3.85g烘干磷酸二氢铵(NH4H2PO4)于1L提取剂中，此溶液为1000μg/mL P标准磷溶液。将此标准磷溶液用提取剂稀释，分别制成1、2、5、10、15和20μg/mL p的标准系列溶液。

操作步骤

称取土样5.00g，放入50mL三角瓶中，加入提取剂25mL，在振荡机上振荡5min，过滤。

吸取滤液1mL，加入工作溶液24mL，摇匀，放置0.5h后(注1、2)在分光光度计上用700nm波长进行比色（注3）(用浸提剂空白调零)。读得吸收值，从标准曲线上查得待测液中磷的浓度。标准曲线绘制：分别准确吸取1、2、5、10、15 和20μg/mL P的标准液1mL分别加入24mL工作溶液，摇匀，放置0.5h后进行比色，绘制标准曲线，最后溶液中磷的浓度分别为0.04、0.08、0.2、0.4、0.6、0.8μg/mL。

结果计算

略

注释

1. 钼锑抗法显色20min达到最高，而且稳定在24h内不变。
2. 风干土样贮存数月不会影响速效磷的提取，但时间放过长了就有影响。含磷的提取溶液应在24h内进行磷的测定，不要放置过长。
3. 测定时的波长在条件许可情况下，最好选用882nm。

本文主要参考自《土壤农业化学分析方法》（鲁如坤主编）、《土壤农化分析》（鲍士旦主编）等。