Luminex液相芯片技术原理及其在生物医学研究中的应用

Luminex液相芯片技术原理及其在生物医学研究中的应用

Luminex液相芯片技术是一种基于荧光编码微球的悬浮阵列原理的高通量检测技术，能够在单个反应体系中同时检测多达100种分析物。该技术在生物医学研究中具有广泛的应用前景，能够为研究人员提供准确、可重复的多指标检测结果。本文将详细介绍Luminex液相芯片的技术原理及其在生物医学研究中的具体应用。

Luminex液相芯片

Luminex液相芯片技术基于荧光编码微球的悬浮阵列原理，通过将特异性抗体共价交联于不同荧光编码的微球表面，实现对多种分析物的同时检测。在一个孔中可同时对多达100种分析物进行检测，利用96孔板作为反应体系，实现高通量、高灵敏度的蛋白精确定量分析，为生物医学研究提供了一种强大的多指标并行检测手段。

原理 —— STEP 1

将样品添加至预先包被了分析物特异性捕获抗体的不同颜色编码的微球悬浮液中，使捕获抗体与目标分析物充分接触并特异性结合。

原理 —— STEP 2

向微球混合物中添加对目标分析物具有特异性的生物素标记检测抗体，与已捕获的目标分析物结合，构建抗体-抗原夹心结构。随后，加入藻红蛋白（PE）标记的链霉亲和素，使其与生物素检测抗体特异性结合，为后续的荧光信号检测提供基础。

原理 —— STEP 3

在双激光流的检测仪器上读取聚苯乙烯珠粒，例如Luminex®100™，Luminex ®200™分析仪。第一个激光器对珠粒进行分类并确定正在检测的分析物。第二激光器确定PE衍生信号的大小，其与结合的分析物的量成正比。

除了Luminex®100™，Luminex ®200™双激光外，还可以使用Luminex MAGPIX®分析仪读取磁珠。MAGPIX分析仪中的磁珠以单个的形式被捕获，通过两个不同的发光二极管（LED）照亮珠子。一个LED识别并检测分析物，另一个LED确定PE衍生信号的大小。每个孔用CCD相机成像。

目前，R&D Systems提供Luminex Assay与 High Performance 2个系列的试剂盒，能够同时对多种复杂样本中的多个指标进行检测和定量。Luminex技术能够针对每一个指标提供准确、可重复的检测结果，仅需少量样本，成本更低，成功实现短时间内获得比其他检测方法更多的数据。

R&D Luminex Assays系列

Luminex® Assay基于微球检测原理，是一种灵活且可自由组合的多因子检测试剂盒。它覆盖了广泛的分析物种类，适用于细胞培养上清液、血清、血浆等多种样本的蛋白定量检测。试剂盒配备经过优化的稀释液，可同时检测多达100种分析物，客户可根据需求自由选择和组合分析物种类。R&D Systems提供的试剂盒采用预混形式，包含抗体和磁珠，简化了实验操作。

特点：

• 灵活性：可同时定量分析多达100种生物标志物，满足复杂生物样本的多指标检测需求。
• 经济高效：通过高通量检测，降低单个样本的检测成本，提高实验性价比。
• 分析物种类不断更新：持续扩展的分析物种类，确保试剂盒的时效性和广泛的应用范围。
• 操作简便，节省时间：优化的实验流程，仅需3-3.5小时即可完成实验，提高科研效率。
• 所需样本量少：低至小于50微升的样本需求，适用于珍贵或有限的生物样本。
• 预混试剂盒：客户无需手动混合试剂，减少人为误差，提高实验的可重复性。

R&D 试剂盒组分：

• 预混的特异性抗体磁珠混合物：包含针对不同分析物的特异性抗体，固定在磁珠表面，用于捕获目标蛋白。
• 预混的生物素化检测抗体混合物：用于与目标蛋白结合，形成夹心结构，增强检测特异性。
• 标准蛋白混合物：用于建立标准曲线，确保检测结果的准确性和可比性。
• 微球稀释液：优化的稀释液，确保微球的稳定性和检测的灵敏度。
• 生物素化抗体稀释液：用于稀释生物素化检测抗体，保证最佳的结合效率。
• 标准品/样本稀释液：用于稀释标准品和样本，减少基质效应，提高检测准确性。
• 洗涤液：用于清洗步骤，去除未结合的试剂，提高信号特异性。
• Streptavidin-PE：用于检测生物素标记的抗体，提供荧光信号。
• 过滤型或平底96孔微孔板：适用于高通量检测，兼容自动化设备。
• 锡箔纸封板膜：保护微孔板中的试剂，防止污染和蒸发。
• 混合瓶：用于试剂的混合，确保均匀性。
• 分析证书：提供详细的试剂盒性能和质量控制信息，确保实验结果的可靠性。

R&D Luminex High Performance Assays系列

Luminex High Performance Assays是R&D公司推出的高精度多分析物检测试剂盒。该试剂盒基于优化的稀释剂体系，通过精细调节检测面板，为22种分析物提供性能卓越的检测方案。适用于细胞培养上清液、血清、血浆、尿液、唾液和乳汁等多种生物样本的检测。

特点：

• 全面优化的检测体系：检测面板中的所有分析物均经过严格优化和性能测试，确保整个检测体系的准确性和可靠性。
• 严格的验证标准：试剂盒的验证测试与Quantikine单因子检测试剂盒相似，保证了高质量的检测结果。
• 灵活的订购方式：试剂盒分为基础试剂盒和微球试剂盒，客户可根据需求单独或组合订购，提供更高的实验设计灵活性。
• 广泛的物种适用性：适用于人和大鼠样本的分析，满足不同研究领域的需求。
• 高效快速：所有检测可在2.5-5小时内完成，显著提高实验效率，缩短研究周期。
• 低样本量需求：检测所需样本量小，低至小于100微升，适用于珍贵或有限的生物样本。

R&D 试剂盒组分：

基础试剂盒：

• 标准蛋白混合物：用于建立标准曲线，确保检测结果的准确性和可比性。
• 微球稀释剂：优化的稀释剂，确保微球的稳定性和检测的灵敏度。
• 生物素抗体稀释剂：用于稀释生物素化检测抗体，保证最佳的结合效率。
• 校准稀释剂：用于校准检测系统，确保检测的准确性和重复性。
• 链霉亲和素-PE：用于检测生物素标记的抗体，提供荧光信号。
• 洗涤缓冲液浓缩液：用于清洗步骤，去除未结合的试剂，提高信号特异性。
• 混合瓶：用于试剂的混合，确保均匀性。
• 过滤底或圆底微孔板：适用于高通量检测，兼容自动化设备。
• 锡箔纸封板膜：保护微孔板中的试剂，防止污染和蒸发。

微球试剂盒：

• 抗体包被的微球：预先包被特异性抗体的微球，用于捕获目标分析物。
• 生物素检测抗体混合物：用于与目标分析物结合，形成夹心结构，增强检测特异性。