PCR检测助力虾苗EHP防控

PCR检测助力虾苗EHP防控

近年来，PCR检测技术在水产养殖领域得到了广泛应用，特别是在对虾苗的EHP（对虾肝肠胞虫）检测中发挥了重要作用。通过对虾苗进行PCR检测，可以有效预防和控制EHP的传播，保障虾苗的健康成长。广州源起健康科技有限公司等企业在这一领域的研究和实践，为养殖户提供了科学有效的检测手段，推动了整个行业的健康发展。

EHP（虾肝肠胞虫）主要攻击对虾的肝胰腺，影响对虾的营养吸收，造成其生长缓慢，免疫力低，增加感染其他病原的风险。EHP从2013年开始在我国暴发，传播至今，给我国对虾养殖业带来巨大经济损失，导致养殖户养虾困难。EHP到底从何而来？虾一旦感染EHP就只能排掉吗？又该如何降低感染风险？基于这些问题，笔者采访了自然资源部第三海洋研究所的李钫博士。

李钫，博士，国家虾蟹产业技术体系岗位科学家，自然资源部第三海洋研究所研究员

EHP为何对虾影响大？

EHP是一种细胞内寄生真菌，属于微孢子虫门，肠孢虫科，肠孢虫属。EHP主要感染对虾的肝胰腺细胞，在其中增殖并产生大量子代孢子，成熟的孢子再随着感染细胞的破裂被释放出来。EHP的感染会影响肝胰腺细胞的能量代谢、阻碍营养的吸收，造成对虾饵料系数升高、生长缓慢、免疫力降低等现象。在EHP严重感染的情况下，对虾易继发其他病原感染，导致肠炎、白便和死亡等情况。值得注意的是，感染EHP之后的发病情况与环境压力直接相关，在环境压力大的情况下，EHP增殖快，对虾易发病。因此EHP对工厂化、高位池、小棚和土池精养等高密度养殖模式影响较大。相比之下，低密度模式下（北方大水面养殖、土塘粗养等亩产<1000斤的模式），感染对虾体内EHP增殖很缓慢，不易发病。

EHP大约在2013年左右传入我国，随后迅速蔓延到各个对虾养殖区，对养殖业造成了长期的危害。我认为EHP对养殖业影响大主要有以下几个方面的原因：第一，EHP感染虽然不造成急性死亡，但影响对虾的营养吸收，造成饵料系数提高、生长缓慢甚至停滞、免疫力低下；不仅延长了养殖周期、增加了养殖成本，且养出的对虾大小不均影响销售。第二，与WSSV、DIV1等烈性病原相比，EHP增殖缓慢，尤其早期感染症状不明显，养殖户不易及时发现问题并止损，导致发病后的经济损失比较大。第三，EHP早期在对虾群体中感染不均匀，而且不会直接导致对虾死亡，存在不少携带病原的无症状个体，因此EHP在虾塘内和虾塘之间传播的几率比烈性病原更高。第四，EHP可能存在一些中间宿主或者携带者，例如其他甲壳类动物和昆虫等，这些动物既是EHP的储存库也是传播者；此外摄食病死虾的鸟类也可能在虾塘间传播病原；因此很难从环境根除EHP。第五，目前没有针对EHP的药物。

EHP的来源：
（1）携带EHP的亲虾或虾苗；
（2）其他感染或携带EHP的动物，如其他甲壳动物、昆虫（如蜻蜓），以及捕食病死虾的鸟类；
（3）携带EHP的鲜活生物饵料，如卤虫和沙蚕等；
（4）未充分消毒的养殖用水或池塘环境。

EHP起源于20世纪90年代末的斑节对虾 ( Penaeus monodon )，并且2004年在泰国的南美白对虾 ( Litopenaeus vannamei ) 中得到了确认，但它很快就扩展到全球范围内，以难以捉摸的方式传播，由于诊断方法有限，常常无法正确识别。

虾肝胰腺中的（EHP）孢子

一、EHP的历史

首先，介绍一下EHP的历史，许多人称其为突发疾病，已经存在了一段时间。早在20世纪80年代末就有斑节对虾（Penaeus monodon）被感染的记录，现在看起来它们可能就是EHP。但2004年，它在泰国的对虾中得到了确认。而我第一次接触EHP是在2011年的泰国；当时是在泰国，确实有EHP引起疾病的病例。

然后，在2012年曼谷GOAL会议期间，我带Donald Lightner博士来到我们的一个实验室，并向他展示了他在来自泰国的病虾中获得的第一个EHP。我们在HP中观察到小元素的簇，Donald Lightner博士也从来没有见过，因为他确实无法辨认。我们只知道这些东西会影响虾的肝胰腺（HP），并且也可以引起其他问题。所以，在那时起，这是一个悬而未决的问题。

之后，它迅速蔓延到中国，我记得大概在2012-2013年之间在中国出现，当时中国的对虾养殖中也存在EHP问题，但是当时并未确定，事后才被确认为EHP。

与此同时，我们在肠道中发现了类似于gregarines（一种感染虾和其他水生动物的常见寄生原生动物）的结构。

随着时间的推移，我们开始了解到，这些类似gregarine的结构，这些ATM（聚合转化微绒毛）与EHP相关，并且在许多地方都可以观察到。但是当时没有PCR技术，一切都是通过显微镜检查来寻找这些小孢子，因此当时很难正确识别它们，这需要你拥有很好的观察力和专业性，才有可能识别它们。

还值得注意的是，这些虾最大的特征是生长缓慢，具有较高的变异系数（CV），但似乎不会导致任何生存的问题。

现在，使用孢子作为诊断并不总是100%准确率，因为EHP有两个阶段。在孢子形成阶段，有孢子，然后是孢子体，孢子看起来像HP组织，而孢子体，必须使用PCR或原位杂交来识别它们，如果它处于孢子体阶段，通常会导致EHP的诊断错误。

随着时间的推移，我们看到EHP出现越来越多的地方，比如：越南、菲律宾、印度尼西亚……，它真正开始袭击印度是在2015年或2016年，而且总是伴随着亲虾的移动而传播。EHP的传播是通过虾进行的，这是我们目前所知的最活跃传播通道。当然，可能还有其他的携带者，但目前这些携带者尚未被充分识别或诊断不足。由于当时诊断EHP无法做到100%准确率，因此，它通过亲虾进入了许多国家。

聚集的转化微绒毛 (ATM) 是类似于聚结蛋白的结构，经常在受感染虾的肝胰腺中观察到。

Donald Lightner博士当时依赖显微镜检测EHP，但也有失误。在诊断上，直到2014年EHP PCR引物的实施，我们才能够确定地诊断EHP。在此之前，第一个引物是肠细胞动物的通用引物，并产生了许多假阳性。特定的EHP引物是由Tim Flegel 博士的实验室与英国其他研究人员合作开发的。这些引物基于检测该特定EHP的孢子壁，因此它更具特异性，并且几乎没有误报。在这些特定的引物出现之前，您会多次测试虾饲料、磷虾粉和鱼粉等饲料成分，以及不同的其他物质，结果可能会出现EHP假阳性。

对虾产业是不落的太阳。2024年中国的虾总产量将达到250万吨，其中南美白对虾仍占93%。据测算，未来中国的虾类年消费量可达500万吨以上，我国对虾需求缺口仍然很大，养虾业大有可为。

小棚虾养殖具有高产、稳定、可控、可复制性的优点，近年来在全国爆发性增长，2020-2024年期间增长率达到12%。据业内统计，2024年我国约有50万张小棚虾，占据对虾养殖总量的30%左右。江苏、山东、广西、广东、浙江为我国小棚虾养殖集中地，此外，在福建、新疆、山西等地亦有分布。

小棚虾养殖是一个封闭系统，养殖过程追求“菌藻稳定”体系，养殖过程几乎不换水。主要养殖风险来自虾苗，对虾肝肠孢子虫（EHP）是最大的经济威胁，有时候会让整个养殖场全军覆没。2024年小棚虾养殖情况比较复杂，福建、广东、江苏如东等多地产区的胞子虫检测出率特别高，即使上半年养得很好的棚，下半年感染胞子虫的概率也很高。此外，高致病性弧菌、EMS、虹彩病毒和亚硝酸盐爆表都是小棚虾养殖过程中的一个个挑战，不容忽视。

除了病害袭击，大量价格低廉的进口对虾进入中国市场，对国内虾价造成冲击。厄瓜多尔作为全球重要的对虾养殖产区，中国是其最大的养殖虾出口市场，占总出口量和出口额的50%以上。2024年1-9月，厄瓜多尔对中国的累计出口量达10.81亿磅，出口额为21.91亿美元。此外，印度、泰国、阿根廷及越南亦有较大数量的对虾进口我国。

基于以上变化，2024年小棚虾养殖出现了模式上的两极分化，即“水源条件一般的产区采取低密度养殖提高成活率”与“水源好的产区采取高密度养殖弥补价格损失”，这两种养殖策略都殊途同归，均取得了不错的养殖效益。

据专家预测，至2025年，市场需求将呈上扬态势，虾类产品价格也将随之改善，这无疑为整个对虾产业注入了一针强心剂。然而，随着2024年末市场需求的日趋多样化，中国对虾养殖场面临着两大关键挑战。一方面，要满足国内市场对优质鲜虾的需求，确保产品的新鲜度、口感与品质；另一方面，需在价格、品质等方面与进口冷冻虾展开竞争，提升自身产品的性价比与竞争力。

在此背景下，健康的对虾养殖模式成为破局关键。能够承受长途运输的对虾品种，以及无疾病携带的优质虾苗，对于产业发展至关重要。而小棚虾养殖模式脱颖而出，凭借其独特优势，业内普遍预计其将在明年迎来崛起之势，成为推动产业发展的一股重要力量。

但值得警惕的是，部分小棚养殖模式采用地下水养殖对虾，这一行为尚未获得所处区域政府部门许可，存在潜在风险。为保障生态环境与产品质量，当地正不断强化监督力度，定期采集废水与虾的样品进行质量检测。一旦发现污染或滥用抗生素的迹象，违规池塘将面临关闭的严厉处罚，这也为整个行业敲响了警钟，督促从业者遵循规范，实现可持续发展。

EHP自2013年传入我国，目前已经在养殖环境中广泛存在。由于EHP可能存在比较广泛的天然宿主，我们目前没有办法将它从环境中彻底根除。但是只要在养殖过程中采用科学的防控措施，如选用优质苗种、养殖前水体环境的充分消毒、关键防控节点进行病原检测、养殖过程的水质的调控和对虾营养的调节等，我们还是能较好地控制EHP，降低EHP的影响，减