甲流疫苗研究获重大突破：单分子mRNA实现80%保护率

甲流疫苗研究获重大突破：单分子mRNA实现80%保护率

甲型流感病毒（简称“甲流”）是全球公共卫生领域面临的重要挑战，每年感染大量人群并导致呼吸道疾病相关死亡。现有流感疫苗主要通过诱导针对流感血凝素（HA）的抗体反应来提供保护，但由于甲流病毒的抗原转移和漂移，这些疫苗对新出现的病毒株的交叉保护能力有限。为克服这一问题，研究人员一直在探索开发广谱流感疫苗，以提供对多种流感病毒株的广泛保护。

近期，一项发表在《Emerging Microbes & Infections》杂志上的研究取得了重大突破。研究团队设计了一种基于单一mRNA分子和多个保守抗原串联的广谱疫苗，该疫苗由甲型流感病毒的三个保守抗原组成，包括M2离子通道的外区（M2e）、血凝素茎区的长α螺旋（LAH）和核蛋白（NP）。这些抗原的选择基于它们在甲流病毒中的高度保守性，能够引发广泛的免疫反应。

研究采用Prime-Boost策略，在BALB/c小鼠身上进行了免疫实验，以评估MLN-mRNA疫苗针对流感病毒所引发的体液免疫反应。实验结果显示，该疫苗引发了针对M2E、LAH多肽和NP蛋白的免疫球蛋白反应，并且这种反应呈现出剂量依赖性。Boost程序显著提高了IgA、IgG1、IgG2a和IgG2b水平，而PRIME单独引发了更高水平的IgM。此外，疫苗免疫还引发了针对A/PR/8病毒的抗体介导的细胞毒性和中和活性（图2）。实验结果表明，该MLN-mRNA疫苗能够引发强大的体液免疫应答。

图2.MLN-mRNA疫苗可引起体液免疫反应
(A) 免疫接种、病毒挑战和抽样战略示意图。BALB/c小鼠按PrimeBoost程序肌肉注射MLN-mRNA疫苗(5、10、20μg)，然后进行病毒攻击和组织标本采集。
(B) 启动或加强后M2e-/LAH-/NP特异性抗体的测定。用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中抗M2e/LAH多肽或NP蛋白的抗体水平。
(C) 使用抗小鼠免疫球蛋白同型特异性抗体确定NP特异性免疫球蛋白抗体的同型。
(D、E)抗原特异性抗体分泌细胞用B细胞ELISpot法分析。免疫后7天(D)对脾组织中M2e-/LAH-/NP特异性抗体分泌细胞进行斑点计数。免疫后7天，对脾、肺和淋巴结中M2e-/LAH-/NP特异性抗体分泌细胞进行斑点计数(E)。
(F)用报告法测血清的ADCC活性，以确定与小鼠FcγR的结合。每个样本进行3次技术重复，并使用非线性回归公式(四参数对数)进行曲线拟合。
(G)免疫后7天20μg疫苗处理组小鼠脾GC B细胞（GL7+CD95+）占B细胞的比例。
(H)从20μg疫苗处理的小鼠中收集的脾TFH细胞（CD4+PD1+CXCR5）在免疫后7天的CD4+T细胞中的比例。
统计学处理采用单因素方差分析；*P<0.001；**P<0.0001。数据表示扫描电子显微镜的平均值和误差条。

研究还评估了MLN-mRNA疫苗在引发细胞免疫应答方面的效果。研究发现，MLN-mRNA编码的肽能够诱导出以Th1为主的细胞免疫应答，表现出高IFN-γ/IL-4比率。与LAH刺激相比，M2e和NP刺激能够剂量依赖性地增加脾、肺和淋巴结中IFN-γ分泌的细胞数量。通过免疫印迹法的检测结果显示，MLN

此外，研究还发现，基于多抗原的MLN-mRNA疫苗提供了最佳的保护效果，使试验组的存活率达到了80%。这一发现展示了MLN mRNA疫苗原型的巨大潜力。

这一突破性研究不仅展示了广谱mRNA疫苗在应对甲流病毒方面的巨大潜力，还为未来的流感防控提供了新的希望。随着mRNA疫苗技术的不断发展，我们有望看到更多创新疫苗的出现，为全球公共卫生事业做出重要贡献。