一文读懂生信分析中的火山图:定义、用途与案例解析
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一文读懂生信分析中的火山图:定义、用途与案例解析
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生信分析是生物医学科研的重要工具之一。在阅读高水平论文时,理解各种生信图表对于深入把握研究内容至关重要。本文将通过具体案例,详细解读生信分析中常见的火山图,帮助读者掌握其定义、用途及解读方法。
火山图的定义与用途
定义:火山图是一种展示两组样本间基因表达差异的图表,通过两个重要指标(Fold change和p-Value)来呈现数据。
用途:
- 差异表达可视化:直观显示基因或蛋白质表达差异。
- 筛选重要目标:快速识别表达变化大且统计显著的基因或蛋白质,有助于发现疾病标记物或药物靶标。
- 趋势观察:通过点的分布情况,了解基因表达变化趋势,如上升或下降基因的数量及变化集中区域。
- 数据质量评估:评估实验数据质量,理想情况下,大多数基因应集中在中部,显著差异基因均匀分布于左右两侧。
- 交互式探索:现代生物信息学软件提供交互式火山图,用户可点击特定点获取基因或蛋白质信息。
- 组合其他分析:与其他生物信息学工具和分析结合使用,如富集分析网络分析等,进一步探索和解释数据中的生物学现象。
结合具体案例解读火山图
案例1:OA组与Gout组的比较
- 坐标解读:
- 纵坐标:当P=0.05时,-log10(P值)≈1.3。纵坐标值大于1.3表示差异显著(P值越小,差异越大)。
- 横坐标:FC(Fold Change)表示差异倍数。当FC=1.2时,log2(FC)≈0.26。log2(FC)的绝对值大于0.26表示差异倍数较大。
- 颜色标识:蓝点表示表达显著下调基因(或蛋白),红点表示表达显著上调基因(或蛋白),灰点表示表达无差异基因(或蛋白)。
- 结论:根据(FC>1.2和FC<1/1.2,P<0.05)的筛选标准,结果显示与Gout相比,OA中有140个蛋白上调,127个蛋白下调。
案例2:WT与naa10△菌株的比较
- FDR解读:
- FDR(False Discovery Rate)是经过统计学方法校正后的P值。图中的虚线代表FDR=0.01,实线代表FDR=0.05(筛选差异基因或蛋白的阈值是FDR<0.05)。
- 可以对关注的基因或蛋白进行颜色标注。
- 差异倍数FC的值是(WT-naa10△)。
- 结论:WT和naa10△菌株之间的差异蛋白质组表达分析表明,在KO中Arg/N-端规则和泛素融合降解途径UBR1、UFD4、UFD2、NTA1、TOM1等上调,而Naa15、Naa50等下调。
关于火山图的相关疑问解答
什么是P值?
P值是衡量统计检验显著性的常用指标。通常情况下,若P-value<0.05,则认为数据间存在显著差异。什么是adjusted P-value?
即经过统计学方法校正后的P-value。常用的校正方法包括“BH”“FDR”等。在一些文章中,筛选差异基因的阈值是FDR<0.05。为什么P值、FC都要取log值?
- P值的数值较小(一般取0.05),在图标上会非常接近坐标轴,不方便解读,因此一般取-log10值。
- 差异倍数FC一般取2倍为筛选标准(有时也会取4倍、1.5倍),为了整体图表的美观性和可读性,会取其log2值。
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