最新指南！Restek 液相色谱柱的使用与维护

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最新指南！Restek 液相色谱柱的使用与维护

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https://ibook.antpedia.com/x/967672.html

液相色谱柱是现代化学和生物化学实验室中常用的分离分析工具，广泛应用于药物研发、环境监测、食品检测等领域。正确使用和维护液相色谱柱，不仅可以提高分析效率和准确性，还能延长色谱柱的使用寿命。本文将为您详细介绍Restek最新版液相色谱柱的使用与维护方法。

2024年Restek最新版液相色谱柱的使用与维护方法指南已正式发布！从出厂报告、硬件信息到安装使用、维护清洗和保存，这份新版指南将为您提供全面详细的指导，帮助您更高效、精准地使用液相色谱柱。

1. 色谱柱的出厂报告

为了确保每支液相色谱柱都具有卓越性能并控制柱间差异，Restek会在出厂前对每支液相色谱柱进行柱效测试并出具测试报告。报告中不仅包含测试条件、色谱图、测试结果、保存溶剂，还包含色谱柱的专有信息：比如序列号和填料的批次号。建议打印并随色谱柱保存此报告，以便后续排查故障时参考。出厂报告查询网址：www.restek.com/documentation

2. 色谱柱硬件

所有Restek液相柱硬件均采用316不锈钢制成。粒径为2.7μm的Raptor核壳柱和粒径大于3μm的多孔硅胶色谱柱使用孔径为2μm的筛板。其余液相柱均使用0.5μm筛板。

虽然Restek液相柱两端接口可与Valco、Parker、Upchurch、Swagelok和其他品牌的10-32尺寸接头兼容。但安装新色谱柱时，请确保连接管路与新色谱柱匹配，如必要请更换连接件螺母和卡套。

拧紧色谱柱与连接件前，请一定确保连接件与色谱柱两端接头连接正确，否则新色谱柱的性能会受到不良影响（例如：柱效下降、峰形拖尾等）或发生渗漏，甚至会使色谱柱难以拆卸。Restek液相柱两端均自带PEEK堵头，安装前拧下堵头即可。(有关色谱柱安装的完整说明，请参阅液相色谱仪的操作手册)。

3. 色谱柱安装与使用

流动相

液相柱出厂报告中标明了保存溶剂(在www.restek.com/documentation下载报告)。在使用前，请确保即将使用的流动相与保存溶剂互溶；如果不互溶，请用与保存溶剂和目标流动相均互溶的溶剂进行过渡。如果不确定溶剂是否互溶，可查阅www.restek.com/solvent-chart中的溶剂互溶表格，或联系Restek技术支持。

使用缓冲盐溶液时需要特别小心，因为大多数色谱柱的出厂保存溶剂含有大于50%的有机溶剂，一定用不含盐的流动相做好过渡，避免保存溶剂与缓冲盐溶液接触导致盐类析出堵塞色谱柱。

流向和流速

色谱柱签中的箭头指示了流向，首先将色谱柱入口端连接到进样器或自动进样器端，出口端用烧杯接好，用流动相（或活化溶剂）冲洗10-15分钟。逐渐将流速提升到最佳流速（见表1）或使用流速。然后停泵，将色谱柱出口端连接到检测器。

由于不同液相色谱仪器之间存在差异，特别是在梯度洗脱模式下，您的结果可能与我们实验室获得的结果不同，Restek技术服务部可以帮助您优化分离，请记录色谱柱使用中的工作压力，便于沟通时参考。

表1：不同粒径、内径色谱柱流速推荐表

平衡

使用前，建议用初始流动相平衡5-10个柱体积。下文介绍了不同类型色谱柱平衡方法，更多信息，详询Restek技术服务。

反相色谱柱平衡
有关反相色谱柱平衡，详细信息请访问www.restek.com/reversephaseconditioning
柱体积计算公式
全多孔颗粒：V = 0.68πr2L，其中V = 柱体积（以mL为单位），r = 柱半径（以cm为单位），L = 柱长度（以cm为单位）；
Raptor核壳柱：柱体积V＝0.50πr2L。
HILIC色谱柱平衡
有关HILIC色谱柱平衡，您可
在安装HILIC色谱柱之前，请先用高比例有机相冲洗液相色谱管路30-60分钟；
开始使用新的HILIC色谱柱或改变流动相组成时，建议用至少50倍柱体积的流动相平衡；
开始使用新批次色谱柱前，应至少执行10次空白进样的完整洗脱程序；
两次进样之间的平衡时间，视具体分析物而定，因此请务必观察保留时间的重现性，以确定重新平衡所需的时间。
Raptor EtG/EtS色谱柱平衡
有关Raptor EtG / EtS色谱柱平衡，详细信息请访问www.restek.com/EtGEtSconditioning
在新色谱柱上全梯度洗脱运行30次基质进样，可确保后续样品分析过程中良好的重现性。