显微镜观察细菌完全指南：难点、技巧与安全来源

创作时间:

作者:

@小白创作中心

显微镜观察细菌完全指南：难点、技巧与安全来源

引用

来源

https://m.bilibili.com/opus/516014267352036076

显微镜观察是探索微观世界的重要工具，而细菌作为最小的生命体之一，其观察难度相对较高。本文将详细介绍如何使用显微镜观察细菌，包括观察难点、具体操作技巧以及安全的细菌来源建议。

为什么细菌很难看见

在明场复合显微镜下很难看到细菌，原因有以下几个：

它们很小：要看其形状，必须使用约400倍至1000倍的放大倍率。光学元件必须良好，以便在此放大倍率下正确分辨。
难以聚焦：在高放大倍率下，细菌细胞将漂浮和聚焦，特别是如果盖玻片和载玻片之间的水层太厚时。
它们是透明的：细菌仅在存在于菌落中时才会显示其颜色。幻灯片上存在的单个单元格清晰。常规的明场光学系统仅在关闭聚光器虹膜光圈时才会显示细菌。这是由于水和细菌细胞之间的折射率不同所致。
难以识别：未经训练的眼睛可能难以将细菌与载玻片上存在的小灰尘和污垢区分开。一些细菌也会形成团块，因此很难看到单个细胞。

研究组织和高级业余爱好者使用相衬光学器件观察细菌。该系统将细菌的折射率差异转换为亮度。然后，可以在明亮的背景上看到透明细菌变暗。在明视场中，关闭聚光镜的虹膜光圈也会使细菌显得更暗，但同时也会在单个细胞周围引入伪影（“条纹”）。这是由于光的衍射。一种可能性是对细菌染色，但是在这种情况下，固定和染色过程可能会引入其他伪影，并杀死细菌。

如何观察细菌

大多数人没有相衬显微镜，这使细菌检查变得容易得多。如果您的显微镜带有聚光镜，仍然可以看到它们。这里有一些建议。

使用40倍物镜：使用10倍目镜，您可以获得400倍的总放大倍率。这足以看到他们。当然，您必须首先着眼于4倍和10倍物镜，然后再向上移动。
完全关闭聚光镜：这将增加对比度和景深。如果您的显微镜没有聚光镜，那么您可能看不到它们。在这种情况下，建议购买一些现成的带有染色细菌的载玻片。
使用很少的水：制作幻灯片时，请使用很少的水，并确保盖玻片下没有较大的颗粒。盖玻片下面必须有一层薄薄的水。否则，细菌可能会垂直漂浮并失焦。保护玻璃不应漂浮在水上。实际上，最好是水太少以至于甚至不能在整个玻璃盖罩下散布。
保持低细菌密度：如果样品中细菌过多，它们将重叠并且您只会看到一个团块。

什么是细菌的安全来源？

出于娱乐或教育目的，切勿使用变质的食物或（禁止上天堂！）使用从人体获得并在琼脂平板上生长的细菌。所涉及的风险根本不值得，尤其是在与学生合作时。其他来源，例如土壤或腐殖质也有其他缺点。杂质使得很难将细菌与其他颗粒区分开，特别是如果使用明场光学器件的话。理想情况下，您只希望细菌，而没有许多其他东西。建议以下内容：

酸奶：可以自己制作酸奶，然后将样品放在显微镜下。应该可以看到小的圆形细胞（cocci），它们也可能成对出现或成链出现。酸奶中也有很多团块，需要在这两者之间寻找。
奶酪：也可以从某些类型的奶酪上刮掉一些细菌细胞。短杆菌可以在例如林堡奶酪上找到。必须知道，有些奶酪使用细菌和真菌的混合物，但是较大的真菌细胞可能胜过细菌。也可以购买冻干细菌。
冷冻干燥：可以购买冷冻干燥的细菌来制作酸奶。取少量并将其放入水中溶解，然后将其置于显微镜下。