新手上路｜PBS和TBS缓冲液怎么选？

新手上路｜PBS和TBS缓冲液怎么选？

在生物学实验中，PBS缓冲液和TBS缓冲液是最常用的两种缓冲液。它们各自具有独特的性质和应用场景。本文将详细介绍这两种缓冲液的区别，并提供选择建议，帮助实验新手更好地掌握它们的使用方法。

PBS缓冲液

PBS（phosphate buffer saline）是磷酸缓冲盐溶液的简称，其渗透压近似于生理条件，同时具有很强的pH缓冲能力。它常用于清洗细胞（不易涨裂）和作为细胞培养的pH缓冲液，是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液。其主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，由于Na2HPO4和KH2PO4的二级解离，其可缓冲的pH值范围很广；而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。

TBS缓冲液

TBS缓冲液是生物学中常使用的等渗缓冲盐溶液，常用于免疫组化和Western Blot实验，清洗非特异性结合的抗体。由Tris-HCl构成稳定的PH缓冲体系，NaCl提供等渗条件。此类缓冲液受生化反应干扰小，不会和一些重金属离子产生沉淀，但其pH受环境和稀释倍数影响较大，且易吸收空气中的CO2，所以配制过程要注意盖紧盖子尽量密封。

Tween的作用

Tween是一种非离子型表面活性剂，可加速抗体非特异性结合的分离，有助于蛋白的洗脱。在Western 实验中，孵育抗体后，用加入TBST洗膜，可以提高抗体识别的特异性。同时在免疫组化实验中，加入Tween后，能够让组织切片清洁更彻底，有复性抗原的作用，可提高抗体特异性的识别能力。

如何选择？

1. PBS适用于大部分的应用场景，无论是用做洗涤、培养都非常合适（但要注意其不适宜情况）
2. 用作抗体稀释液的话，等渗缓冲盐溶液TBS对抗体的干扰更小
3. 进一步用于组化的抗体稀释液，则含有Tween-20的TBST是最合适之选