水蛭素提取的方法研究

水蛭素提取的方法研究

水蛭素是一种具有重要药用价值的生物活性物质，主要存在于水蛭的唾液中。本文详细介绍了水蛭素的提取部位选择及其具体的提取方法，包括使用有机溶剂和水提取两种方式。这些信息对于从事生物化学、药物研发等相关领域的研究人员具有重要参考价值。

水蛭素提取的有效部位

水蛭素主要产生于水蛭的唾液里，当水蛭吸血时，将其分泌出来，阻止血液凝固。因此，实践表明，提取水蛭素的最佳部位在头部。研究发现，从水蛭头部提取的水蛭素活性最强，而从去头后的体部得到的是伪水蛭素，虽然化学性质相同但无抗凝活性。

水蛭素的提取方法

1. 用能与水混溶的有机溶剂提取

• 从水蛭头部提取：将水蛭头部剪下并切成碎片，使用其10倍体积的40%丙酮-水溶液提取两次，每次30分钟。合并提取液后，加入1/2体积的80%丙酮-水溶液，并用冰醋酸调节pH至4.3-4.5。离心去除沉淀后，用氨水将上清液调至pH6.0，在40℃下减压浓缩至原体积的1/10。最后用10%三氯醋酸调节pH至1.8，并加入10倍体积的冷丙酮（-5℃-0℃）使粗水蛭素沉淀析出。

• 从水蛭整体中提取：将80%的冷丙酮加入磨碎的水蛭粉中，搅拌10分钟后，加入氯化钠（0.2-0.5mol/L）和三氯醋酸（0.1-0.4mol/L），使pH值达到2.5-3.5，搅拌30-60分钟。倾出上清液后，沉渣再用1/3体积的上述80%丙酮提取一次。合并两次提取液后，加入2倍体积的冷丙酮（-10℃），使粗水蛭素沉淀析出。

2. 用水提取

将水蛭磨成细粉，加入0.5mol/L氯化钠液，室温搅拌30-60分钟，调节pH至2.0-2.5后，升温至70℃，搅拌15分钟离心去渣。上清液调至pH6.5-7.0，加入1.5倍体积的乙醇去除沉淀。上清液在30℃-40℃下真空浓缩至原体积的1/20左右。向浓缩液中加入等体积的丙酮去除沉淀，再加入4倍体积的冷丙酮（-5℃-0℃）使粗水蛭素沉淀析出。

水蛭素的分离，多采用离子交换、凝胶层析和等电聚焦等方法。如需进一步研究，可以分离得到纯晶。

本文原文发布于2017年