抗体验证过程中,如何确保实验结果的可靠性?
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抗体验证过程中,如何确保实验结果的可靠性?
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抗体验证是生物医学研究中确保实验结果可靠性的重要环节。本文将介绍抗体验证过程中需要遵循的关键步骤和策略,帮助研究人员提高实验结果的准确性和可信度。
确保抗体验证过程中实验结果的可靠性,可以遵循以下几个关键步骤和策略:
分析验证原则
根据美国病理家学会及实验室质量中心发布的指南推荐,实验室必须确认验证所有的免疫组化(IHC)试验结果后才能用于临床。这包括将新的检验结果与形态学和预期结果相比较,以及与同一样本的前次检验结果进行比较。
整体一致性
对于临床应用的每一种已经初步验证的检验方案,新检验和前次检验或预期的实验室结果必须达到至少90%的整体一致性。如果一致性小于90%,需要探讨一致性低的原因。
抗体验证标准
Abcam提到,抗体验证只对特定的应用有效,需要使用始终能够特异性、选择性地与预期靶点结合的抗体。抗体的验证包括ELISA、Western blot、免疫组织化学和免疫细胞化学等多种方法。
ELISA验证
在开发夹心ELISA时,需要认真选择配对抗体对,确保两种抗体均能与靶蛋白特异性结合。通过加标回收率实验来验证抗体选择性,并在血浆、血清或组织裂解液中验证各抗体对的性能。
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