南方医科大学最新研究：香连丸通过调节衣康酸抑制M1巨噬细胞极化，缓解溃疡性结肠炎

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南方医科大学最新研究：香连丸通过调节衣康酸抑制M1巨噬细胞极化，缓解溃疡性结肠炎

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香连丸是一种传统中药，具有清热、燥湿、行气、止痛的功效。近年来，南方医科大学的研究团队发现，香连丸可以通过调节能量代谢产物衣康酸（ITA）来抑制M1型巨噬细胞的极化，从而有效缓解溃疡性结肠炎（UC）的症状。这一发现为UC的治疗提供了新的思路和方法。

研究背景

溃疡性结肠炎（UC）是一种以粘膜炎症为特征的疾病，其临床表现多样，包括腹痛、腹泻及血便等症状。UC的发病机制复杂，涉及环境因素、遗传倾向、饮食习惯、肠道微生物群的功能异常、肠上皮细胞的损伤以及免疫反应的失调等多种因素。特别值得注意的是，肠黏膜内的过度炎症反应是UC发病过程的关键因素。然而，UC患者免疫反应功能障碍的具体致病机制仍需进一步研究。

香连丸的成分分析及其对UC的影响

研究采用高效液相色谱法（HPLC）对香连丸组分进行了表征。经测试，样品中香连丸成分的指纹图谱显示出良好的重复性。鉴定出的化学成分包括药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、木香烃内酯和去氢木香内酯，其含量分别为2.41±0.01、18.68±0.04、8.03±0.09、41.84±0.11、1.88±0.01和2.85±0.03 mg/g。这些化合物可能是参与UC治疗的香连丸的生物活性成分。

研究结果表明，香连丸逆转了UC小鼠体重的下降趋势。香连丸还降低了疾病活动指数（DAI）评分，并以剂量依赖性的方式增加了UC小鼠的结肠长度。组织病理学分析显示，经DSS诱导后，肠绒毛组织受损，炎性细胞浸润至结肠黏膜中，而香连丸和5-氨基水杨酸（5-ASA）逆转了这些变化。此外，与DSS组相比，香连丸以剂量依赖性的方式显著降低了结肠组织匀浆中的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）水平。结果表明，香连丸和5-ASA对UC的疗效相似，具有良好的治疗效果。

香连丸抑制UC小鼠M1巨噬细胞极化

黏膜组织受损导致病原体侵袭及巨噬细胞的浸润，特别是M1型巨噬细胞的浸润。这一过程促进了促炎细胞因子的释放，从而诱发了UC。数据显示，DSS组的肠系膜淋巴结（MLN）中F4/80和CD11c共表达的巨噬细胞比例高于未处理组。然而，香连丸在剂量依赖性上逆转了这些变化。为进一步鉴别结肠组织中的M1型巨噬细胞，研究对F4/80和CD11c标记物进行了共染色分析。结果表明，香连丸显著减少了UC模型小鼠中F4/80和CD11c的表达量。基于这些发现，香连丸通过抑制M1型巨噬细胞的极化来治疗UC。

图3 香连丸对UC小鼠M1巨噬细胞水平的影响

ITA改善香连丸对UC和M1巨噬细胞极化的调节作用

由于ITA（衣康酸）能调节炎症反应，因此，研究探讨了ITA水平升高是否影响香连丸对UC的作用。和DSS组相比，ITA使得UC小鼠体重减轻情况得到缓解，DAI降低，结肠变长。组织切片显示，ITA修复了肠道的损伤，减少了结肠里的炎症细胞。结果说明，ITA在治疗UC方面具有一定潜力，和香连丸联合使用时，疗效更加。此外，ITA及香连丸都让MLN里的F4/80+CD11c+巨噬细胞数量明显减少（P<0.01）。说明香连丸加上ITA能减少M1型巨噬细胞的数量，从而改善UC。另外，ITA和香连丸处理后，Gapdh和Ldha的相对mRNA水平也明显下降了。

ITA通过抑制TET2/STAT1和TET2/NF-κB通路降低M1巨噬细胞的极化和炎症反应

该研究还进一步探究了ITA是否能在RAW264.7细胞上直接抑制M1巨噬细胞的极化。通过测定包括TNF-α、IL-6、iNOS和IL-1β在内的多种指标的mRNA水平，研究确认了巨噬细胞从M0极化至M1的表型变化。然而，ITA逆转了TNF-α、IL-6、iNOS和IL-1β的mRNA表达水平的升高。免疫荧光染色揭示，在M0至M1极化过程中，巨噬细胞体积增大，TNF-α、IL-6和iNOS的表达亦增加。ITA下调了这些标志物的表达，表明其具备抑制M1巨噬细胞极化的潜能。这一发现与转录组学和能量代谢分析的结果相吻合，因为ITA不仅降低了M1巨噬细胞中Gapdh和Ldha的mRNA水平，还抑制了Gapdh与Ldh的活性。这些结果表明ITA对Gapdh和Ldh酶活性具有抑制作用。

此外，结果显示，ITA显著降低了M1巨噬细胞中的TET2 mRNA水平。ITA显著降低了STAT1、CXCL9和CXCL10的mRNA水平，表明其抑制了TET2/STAT1通路。同样，ITA分别下调了Nfkbiz和NF-κB的mRNA和蛋白质表达水平，表明其具备抑制TET2/NF-κB通路的潜力。这些研究发现表明，ITA通过抑制TET2/STAT1和TET2/NF-κB通路来降低M1巨噬细胞的炎症反应。