还原糖的测定--蓝—爱农(Lane—Eynon)法(菲林法)
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还原糖的测定--蓝—爱农(Lane—Eynon)法(菲林法)
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还原糖测定是食品科学和化学领域中的一个重要实验,其中蓝—爱农(Lane—Eynon)法(菲林法)是一种常用的测定方法。本文将详细介绍该方法的原理、操作步骤和计算方法。
蓝—爱农(Lane—Eynon)法(菲林法)原理
比直接法的试剂中少亚铁氰化钾,终点为红色。适于0.2%的还原糖含量。
斐林试剂甲液(CuSO4·5H2O)
斐林试剂乙液(酒石酸钾钠+NaOH)
甲、乙混合→酒石酸钾钠合铜
酒石酸钾钠合铜+葡萄糖→葡萄糖酸+Cu2O↓(红棕)
终点的确定
葡萄糖+亚甲基蓝(氧化态)→亚甲基蓝(还原态)
过量兰色无色
(兰色消失)
终点时的颜色为:兰色消失了的红棕色
测定步骤
预测
准确吸取斐林试剂甲液5.00mL、乙液5.00mL→锥形瓶中,△至沸腾,再加入亚甲基蓝指示剂,在加热的条件下,用样液滴至蓝色褪尽。(先快后慢,要求很快达到终点,因为亚甲基蓝易被空气氧化为蓝色,且要求在加热的情况下以除去空气)测定
甲液5mL、乙液5mL→锥形瓶中,加入比上述预测量少0.5~1ml样液在2min内沸腾,维持沸腾2min,加入3滴亚甲基蓝指示剂,再在3min内滴定至蓝色褪尽。
计算
F
还原糖% = ---------------------×100
( V1/V )× m
m--样品质量,mg;V1--滴定量mL;V--样液总mL;
F--还原糖因素,10mL费林试剂,相当的还原糖量mg
F的求得有两种方法:
A、用标准还原糖液用上面同样方法标定10ml费林试剂求得。
B、查蓝—爱农法专用“还原糖因数表”附表
例若V1=26则F=49.9
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