利用PMA诱导THP-1分化为巨噬细胞的实用指南

利用PMA诱导THP-1分化为巨噬细胞的实用指南

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https://m.sohu.com/a/830405617_121966560/?pvid=000115_3w_a

THP-1细胞作为人单核细胞白血病细胞系，在科研领域常被用于诱导分化为巨噬细胞，以模拟体内巨噬细胞功能与特性，而佛波酯（PMA）是诱导这一过程的关键试剂。以下详述操作要点。

前期准备至关重要。先确保细胞培养环境稳定适宜，在含10%胎牛血清、1%青-链霉素的RPMI 1640培养基里，将THP-1细胞置于37°C、5% CO₂的细胞培养箱中常规培养，维持细胞处于对数生长期，此时细胞活性与增殖能力强，为后续诱导分化奠基。同时，准备高质量的PMA试剂，以DMSO溶解配制成储存液，-20°C避光保存，使用前依实验需求稀释到工作浓度。

诱导分化操作精细把控。取对数生长期THP-1细胞，计数后按1×10⁶个/mL密度接种至培养器皿，像6孔板、24孔板等依实验规模选定。加入PMA使其终浓度达20-100 ng/mL（常选50 ng/mL），轻柔摇匀确保均匀分布。随即放回培养箱，24-48小时是关键观察期。期间，细胞形态渐变，由悬浮的圆形单核细胞向贴壁伸展、胞体变大且有伪足伸出的巨噬细胞转化，显微镜下可清晰捕捉这一动态。