MES缓冲液的配置——举个例子
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MES缓冲液的配置——举个例子
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MES缓冲液是一种常用的生化实验缓冲剂,广泛应用于细胞培养、酶活性测定、电泳和蛋白质研究等领域。本文将详细介绍MES缓冲液的配置方法,包括所需试剂、配置步骤以及具体实例。
MES缓冲液
MES,又名2-吗啉乙磺酸,是一种二元缓冲液,具有良好的缓冲能力和化学稳定性,是一种常用的生化实验缓冲剂。MES缓冲液广泛应用于生物化学和分子生物学实验,如细胞培养、酶活性测定、电泳和蛋白质研究。
缓冲范围:pH 5.5 - 6.7
注意事项:配制MES缓冲液时,要用NaOH或KOH调pH到目标pH值(pH5.5 - 6.7)。MES易溶于水,呈无色透明状。未调pH之前,MES溶液的pH位于2.5到5之间。0℃时,饱和MES溶液的浓度约为0.65M。
MES缓冲液的配置步骤
准备所需试剂:MES、NaCl、NaOH、HCl等。MES缓冲液的主要成分是MES,它是一种有机酸,能够提供缓冲效果。此外,还需要NaCl来维持渗透压,并加入适量的盐酸或NaOH调节至所需pH。
将MES和NaCl按照一定比例溶于去离子水中。使用去离子水可以保证缓冲液的纯度,而MES和NaCl的比例则根据具体实验需求进行配置。
根据所需的pH值,加入适量NaOH或HCl精确调节。注意加入的酸碱加入的量,根据pH计监测数值,逐步添加酸或者减。pH计使用前需校准。
定容至所需体积,充分搅拌或混匀。
具体方案
MES (0.5 M, pH 6) :
- 在合适的容器中准备 800 mL dH2O。
- 向溶液中添加 97.62 g MES 游离酸。
- 0.5M MES 溶液的起始 pH 值为 3.23。对于 1 L 0.5 M MES,需要 13.6 ml 10N NaOH 将 pH 值调节至 6.0
- 添加 dH2O 直至体积为 1 L。
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