溶瘤病毒服务

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腺病毒（adenovirus，AdV）

图1 腺病毒结构（Viral zone网站）

腺病毒（adenovirus，AdV）是一种无包膜的、直径约为70-90 nm的双链DNA病毒（图1），其基因组大小约为36kb，分为早期（E1A，E1B，E2，E3，E4）、中期（IVa2，pIX）和晚期（L1-L5）转录单元（图2）。腺病毒有50多种血清型，其中的常用血清型为Ad5。腺病毒具有组织嗜性和感染分裂和非分裂细胞的能力，常用的AdV载体分为条件复制型（Conditionally Replicating Adenovirus，CRA; oAd）和复制缺陷型腺病毒（Replication-defective Adenovirus）载体，广泛应用于预防性疫苗、治疗性疫苗以及溶瘤病毒领域。

图2 腺病毒基因组结构（A Handbook of Gene and Cell Therapy）

条件复制型腺病毒载体通过突变或改变E1基因的表达，能使腺病毒在癌细胞中特异性复制。腺病毒E1A CR2或E1B55K通过视网膜母细胞瘤蛋白(Rb) 和p53细胞信号通路干扰宿主细胞的细胞周期，使正常细胞复制进入S期，从而实现大量复制。在E1A CR2或E1B55K缺失后，细胞分裂受抑制，使病毒不能在正常细胞中复制，但可以在Rb和p53调控异常的癌细胞中大量复制。

溶瘤腺病毒（oncolytic adenovirus，oAd）是以腺病毒为基础发展起来的工具病毒，经过人工改造后，可以特异性杀伤肿瘤细胞，具有感染宿主广、安全易生产、可插入较大外源基因等优点而被广泛地研究和应用。

溶瘤腺病毒改造策略

腺病毒作为溶瘤病毒常用的一些改造位点有：E1A-CR2、E1B-55K、E1B-19K等，以及通过肿瘤组织特异性启动子驱动E1A等来增加病毒的靶向性，或者作为载体构建外源免疫相关基因，如IL-12，IFN-γ，GM-CSF等，并结合放疗/化疗的传统疗法或结合单抗或CAR-T等生物疗法，通过多种途径的协同作用对肿瘤细胞进行杀伤。

部分oAd改造策略

实验验证


应用案例

Nadofaragene firadenovec（Adstiladrin）是一种基于非复制型腺病毒载体，治疗对BCG（卡介苗）无应答、伴有原位癌（CIS）的高风险NMIBC（非肌性浸润性膀胱癌）成人患者，它是首个被批准用于治疗膀胱癌的基因疗法。

Adstiladrin编码干扰素（IFN）-α2b，一方面诱导肿瘤细胞内的ER Stress，引起Caspase 4激活，导致细胞凋亡，另一方面TNF相关的TRAIL（肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体）激活引起癌细胞凋亡（图3）；此外，肿瘤细胞内碱性成纤维细胞生长因子和基质金属蛋白酶-9下调的间接抗血管生成作用也有助于细胞凋亡；IFN-α信号激活了抗癌免疫反应，包括T 细胞、自然杀伤细胞和树突状细胞活化来对抗癌细胞。