问小白 wenxiaobai
资讯
历史
科技
环境与自然
成长
游戏
财经
文学与艺术
美食
健康
家居
文化
情感
汽车
三农
军事
旅行
运动
教育
生活
星座命理

写给养鼠新人的详细攻略,让你接到鼠鼠后不再手忙脚乱

创作时间:
作者:
@小白创作中心

写给养鼠新人的详细攻略,让你接到鼠鼠后不再手忙脚乱

引用
1
来源
1.
https://finance.sina.cn/stock/med/2024-12-19/detail-inczyhfy0247438.d.html

很多同学在课题进展到一定状态后,都会需要小鼠来开展后续实验。但面对着珍贵实验鼠鼠时,新晋铲屎官们常常手足无措,无从下手。小鼠状态越来越差不说,甚至出现断种的情况。

既然想要成为一个合格的铲屎官,就该尽早做好准备。今天鼠博士就给大家讲述引进小鼠时需考虑的几大问题。建议每个新晋铲屎官都收藏一下~

引进小鼠前

确定小鼠类型:

  • 明确小鼠背景:常见近交系小鼠品系有C57BL/6(毛色为黑色) 、BALB/c(毛色为白色)、FVB(毛色为白色)、ICR(毛色为白色)等。

  • 明确小鼠类型:小鼠为野生型小鼠、无菌鼠还是基因编辑小鼠,小鼠免疫系统是否健全等。建议免疫缺陷动物和免疫健全动物分开房间饲养。

确定小鼠饲养环境:

  • 询问小鼠来源机构(实验室/供应商)小鼠合适饲养环境。根据《GB14922-2022实验动物微生物、寄生虫学等级及监测标准》,按照相应的微生物控制标准,实验动物分为两级:一级,无特定病原体级动物specific pathogen free (SPF) animal;二级,无菌级动物germ free (GF) animal。

  • 确认引入小鼠的微生物质量标准。建议从可靠供应商购买动物,并要求小鼠来源机构提供动物健康报告,或按照动物房要求进行病原微生物的检测。

  • 了解自身所在机构IACUC动物伦理申报流程,进行IACUC动物伦理申报,获得相关批准文件。

  • 联系动物房/动物中心询问小鼠如何引进,按照不同单位各自流程办理引入外来小鼠流程。

  • 根据引入小鼠类型与数量,提前准备好合适的笼位数。

水和食物的供应:

  • 根据小鼠与实验需求,准备好合适的饲料与水。

  • 饲料:常规小鼠使用常规生长繁殖饲料即可(脂肪含量为5%左右),其他特殊情况视情况而定。若需中途更换饲料,需有过渡过程,避免动物产生应激。饲料需灭菌,灭菌方式可选择高温高压灭菌、辐照灭菌等。

  • 饮用水:可使用pH2.5-3.0的酸化水、氯化水、高压无菌水、纯化水等。

引进小鼠时

确定小鼠基本信息:

  • 了解小鼠编号标记的方法,便于准确辨认小鼠:

  • 耳标法:用专门的耳孔机在小鼠耳朵上打孔或造成缺口,或者用剪刀在耳朵边缘剪出不同的缺口进行编号。

  • 染色法:用毛笔或棉签蘸取化学药品,在实验动物体表不同部位涂上斑点,以示不同编号。常用染液有:3–5% 的苦味酸溶液(黄色);0.5% 的中性品红溶液(红色);2% 的硝酸银溶液(咖啡色)。染色法适用于数量少,实验周期短的大小鼠。

  • tattoo 法:使用专用的大小鼠tattoo仪器对新生以及成年大鼠小鼠等进行动物纹身,不需要麻醉设备即可快速产生固定且长期保存的ID。

  • 断趾编号法:根据对新生小鼠前肢 4 趾,后肢 5 趾的切断位置来进行编号。该方法仅适用于出生0-7天内的小鼠,每个小鼠的单侧趾禁止同时切断两个以上。

  • 检测小鼠编号、数量、性别、周龄、基因型等基本信息是否与标签相符。

观察小鼠基本情况:

  • 皮毛:有无光泽、竖毛、出血、污物、脱毛。
  • 眼:有无分泌物、流泪、白内障、角膜损伤。
  • 口腔:有无流涎、出血。
  • 耳:有无外伤、耳壳曲折、耳部炎症。
  • 四肢:有无外伤、弯曲、脱臼、肿胀、关节炎症。
  • 肛门:有无排泄残留物、血便、脱肛。
  • 精神和食欲:沉默、倦怠、动作不活泼、食欲不振、拒食。
  • 营养状况:消瘦、过度肥胖、成长异常。
  • 姿势和步态:姿势异常、行走和站立困难、运动失调、跛行。

稳定小鼠状态:

  • 小鼠在引入后需经过环境适应期3-5天后,方可进行实验操作。
  • 尽量减少噪音、振动、气味干扰,辅助小鼠尽快适应新环境。

复核小鼠基因型

  • 询问小鼠来源机构(实验室/供应商)小鼠基因型具体检测方案,购买相应试剂。
  • 将引进小鼠剪尾,复核基因型,明确小鼠信息,同时检验基因检测方案是否可行。

引进小鼠后

明确目前实验需求

  • 需要快速使用小鼠进行实验。(订购野生型、动物造模模型或大量单一基因型小鼠)
  • 需要大量获得某种基因型小鼠,小鼠处于被积极使用状态。(订购繁殖对自行繁殖)
  • 需要维持品系但不扩大其规模,小鼠处于维持状态。

设计繁育策略并制定种群管理计划

  • 向小鼠来源机构(实验室/供应商)了解小鼠繁育特征。小鼠的基本繁育信息可见下表:
品种
性成熟时间
怀孕期
每胎平均产仔数
每年平均产仔数
C57BL/6
5-6周
19-21天
6-8只
10-12胎
BALB/c
5-6周
19-21天
6-8只
10-12胎
FVB
5-6周
19-21天
6-8只
10-12胎
ICR
5-6周
19-21天
6-8只
10-12胎
  • 繁育策略设定:根据基因小鼠的类型,参考下面方式,制定繁育笼配繁策略。
基因型
繁育策略
野生型
自由配对
单基因突变
杂合子配对
多基因突变
特殊设计配对
转基因
特殊设计配对
  • 种群管理计划制定:根据实验小鼠是被积极使用状态还是维持状态制定繁育笼数

若小鼠是被积极使用状态,尽量使目标基因型的比率保持在 1/8 (12.5%) 或更高,并且根据小鼠所需数量,结合怀孕率、 产仔数、 性别、基因偏差等因素计算出所需笼位数。

若小鼠是维持状态,保持至少两代小鼠,每代包括两到三对姐妹兄弟的繁殖。在新一代的小鼠被证明有生育能力之前,不要淘汰任何年老繁殖对。并且需要密切监测繁育性能。除此之外,可考虑对实验所用小鼠品系进行冷冻保存,便于保存遗传特性,避免育种失败等问题发生。

小鼠繁育Tips:

根据繁育策略建立好繁育笼后,还是会出现各种各样的问题影响小鼠繁育,遇到问题时可参考下表进行改善:

问题
可能原因
改善措施
产仔数少
饲养环境差
改善饲养环境
怀孕率低
配种不当
重新配种
小鼠死亡率高
疾病感染
加强疾病防控
基因型不稳定
配种策略错误
调整配种策略

记录种群信息:

开始饲养小鼠后,小鼠的信息记录对于种群管理非常重要,主要在于笼卡与饲养记录表。

  • 笼卡分为饲养笼与繁殖笼,两者包含信息见下表:
笼卡类型
信息内容
饲养笼
小鼠编号、性别、年龄、健康状况
繁殖笼
父母编号、交配日期、预产期
  • 饲养记录:

除了笼卡以外,我们还要用表格把所有的小鼠情况汇总记录下来,可以包括小鼠的编号、出生日期、代次、性别、基因型信息、亲代小鼠信息、交配日期、目前状态、体重信息等等,便于统计与管理。

小鼠基因型鉴定

小鼠基因组鉴定也是常常困扰新晋铲屎官的点,鼠博士这边的建议是,首先按照小鼠来源机构(实验室/供应商)小鼠基因型具体检测方案来执行,若还有一些问题,可以参考下表进行改进。

问题
可能原因
改善措施
检测结果不稳定
操作不当
重新培训操作人员
基因型错误
样本污染
严格控制样本处理流程
检测效率低
设备老化
更新检测设备
© 2023 北京元石科技有限公司 ◎ 京公网安备 11010802042949号