SP20细胞（Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞）

SP20细胞（Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞）

货号：STM-CL-6514 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

SP20细胞（Sp2/0-Ag14小鼠骨髓瘤细胞）

• 细胞特征：悬浮细胞，淋巴母细胞样
• 培养基：DMEM＋10% FBS＋1% P/S
• 其他：Sp2/0-Ag14细胞不分泌免疫球蛋白，这使其成为单克隆抗体生产的理想选择

Sp2/0-Ag14细胞系是通过将经过绵羊红细胞免疫的BALB/c小鼠脾细胞与P3X63Ag8骨髓瘤细胞融合而形成的，是一种小鼠骨髓瘤细胞系，由B淋巴细胞从小鼠脾脏分离。主要用于单克隆抗体的生产。SP20细胞在免疫学研究中具有重要应用。

SP20细胞特性特征

• 不分泌免疫球蛋白：SP20细胞不分泌免疫球蛋白，这使其成为单克隆抗体生产的理想选择.

• 药物敏感性：SP20细胞系对20μg/ml的8-氮鸟嘌呤具有抗性，并且对HAT（次黄嘌呤-氨基蝶呤-胸苷）敏感.

• 病毒检测：SP20细胞系鼠痘病毒（ECTV）呈阴性，并通过了支原体检测.

• 抗原表达：SP20细胞系表达H-2d抗原，这是小鼠的主要组织相容性复合体（MHC）抗原之一.

• 基因特征：由于其不分泌免疫球蛋白的特性，SP20细胞系在基因水平上缺乏相关的免疫球蛋白基因表达，这使其在单克隆抗体生产中具有独特的优势

SP20细胞参数表

| 形态 | 淋巴母细胞样，悬浮生长 |
| 培养基 | DMEM，10%胎牛血清（FBS），青霉素和链霉素 |
| 培养条件 | 37°C，95%空气，5%二氧化碳 |
| 传代 | 1:2至1:3，每周3次，传代时达80%-90% |
| 抗原表达 | H-2d |
| 免疫球蛋白 | 不分泌 |
| 8-氮鸟嘌呤 | 对20μg/ml抗性 |
| HAT | 敏感 |
| 病毒检测 | 鼠痘病毒（ECTV）阴性 |
| 支原体检测 | 阴性 |
| 应用 | 单克隆抗体生产、细胞融合实验、抗体工程 |
| 复苏活力 | 存活率 > 90% |
| 冻存温度 | -196°C（液氮） |
| 运输温度 | -80°C（干冰） |

培养教程

细胞复苏

• 从液氮中取出冻存的SP20细胞，迅速放入37°C水浴中解冻。

• 将解冻的SP20细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中。

• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清。

• 用新鲜培养基重悬SP20细胞，并转移到培养瓶中。

• 将培养瓶置于37°C，5% CO2培养箱中培养。

细胞传代

• 传代比例：1:2至1:4；传代频率：每周2~3次

• 当SP20细胞密度达到80%-90%时进行传代。

• 收集细胞悬液，1000rpm离心5分钟。

• 弃去上清，用新鲜培养基重悬SP20细胞。

• 按照传代比例将SP20细胞分配到新的培养瓶中。

• 添加新鲜培养基至适当体积。

• 将培养瓶置于培养箱中继续培养。

换液

• 频率：每周2~3次

• 方法：更换50-70%的旧培养基为新鲜培养基。

细胞冻存

• 冻存液配方：55%基础培养基 + 40%FBS + 5%DMSO

• 收集对数生长期的SP20细胞。

• 以1000rpm离心5分钟，弃去上清。

• 用冻存液重悬SP20细胞，调整密度至1-2×10^6个/ml。

• 将SP20细胞悬液分装到冻存管中。

• 将冻存管放入程序降温盒中，置于-80°C冰箱中缓慢降温。

• 24小时后转移到液氮中长期保存。

注意事项

• 定期检查SP20细胞形态和生长状况。

• 保持无菌操作，避免污染。

• 定期进行支原体检测。

• 细胞密度应保持在适当范围内，不宜过高或过低。

• 避免反复冻融SP20细胞，以防影响细胞活性。

SP20细胞的实验优势

• 单克隆抗体生产：由于不分泌免疫球蛋白，SP20细胞是制备杂交瘤和生产单克隆抗体的理想选择。

• 细胞融合实验：SP20细胞可以作为细胞融合中的B细胞组分，用于制备杂交瘤。

• 抗体工程：在抗体工程和改造中，SP20细胞可作为重要的工具细胞。

• 药物敏感性研究：SP20细胞对20μg/ml的8-氮鸟嘌呤有抗性，对HAT培养基敏感，可用于相关药物研究。

• 肿瘤学研究：作为骨髓瘤细胞模型，SP20细胞可用于评估新治疗方法和药物的有效性，以及研究浆细胞瘤的发生和发展机制。

• 基因转染和蛋白质表达：SP20细胞适用于基因转染和蛋白质表达的体外实验模型。