神奇草药汤剂如何激活大脑修复奇迹？广州中医大学与东莞市中医院联合探析

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神奇草药汤剂如何激活大脑修复奇迹？广州中医大学与东莞市中医院联合探析

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https://www.medsci.cn/article/show_article.do?id=8f748490457b

缺血性中风是一种常见的脑血管疾病，其特点是脑动脉狭窄或阻塞导致大脑供血不足，引发脑组织坏死。目前的治疗手段有限，且成本高昂。近期，广州中医药大学与东莞市中医院联合开展的一项研究，从神经科学的角度揭示了传统中药方剂——补阳还五汤（BYHWD）在治疗缺血性脑卒中方面的独特作用机制。

补阳还五汤的功效与应用

补阳还五汤（BYHWD）具有补气、活血、通络的功效，主要用于治疗中风导致的气虚血瘀证，如半身不遂、口眼歪斜等症状。临床实践中，该方剂常用于脑血管意外后遗症、冠心病、小儿麻痹后遗症的治疗，以及因其他原因导致的偏瘫、截瘫、单侧上肢或下肢无力等气虚血瘀症状。

研究方法与实验设计

研究团队采用改进的缝合技术构建了大鼠MCAO模型，并将实验对象分为对照组、模型组以及不同剂量的BYHWD组（5g/kg、10g/kg、20g/kg）。此外，还建立了稳定可靠的（OGD/R）SH-SY5Y细胞模型，以观察实验结果并进行分析。

BYHWD对MCAO大鼠的影响

体重变化

给药后的第三天，相较于模型组，其他治疗组的体重显示出统计学意义上的显著增长。结果揭示，BYHWD能够有效地提升MCAO大鼠的体重，并有助于其身体的恢复。

图2 BYHWD增强了MCAO大鼠的神经功能

脑梗死体积

TTC染色结果显示，模型组大鼠的脑梗死体积显著增加。经过BYHWD（剂量为10g/kg和20g/kg）处理后，脑梗死体积有显著减少。表明BYHWD能够显著降低MCAO大鼠的脑梗死体积。

病理变化

研究采用HE染色法对组织形态变化进行了评估。结果显示，假手术组脑组织中，皮质和海马区域的神经元形态保持正常。相比之下，模型组的缺血性皮质和海马区域脑组织基质疏松、水肿以及血管周围空间的扩大，特别是在皮质和海马的CA1区域，组织损伤尤为严重。此外，缺血性皮层和海马体中大量神经元丧失，剩余的神经元多数呈现细胞质和细胞核的萎缩。部分神经元无序聚集，出现破裂和肿胀现象。

BYHWD治疗后，缺血性皮质和海马区域中部分神经元的病理状态得到改善，细胞间空间缩小，固缩细胞数量减少。BYHWD（10g/kg和20g/kg）干预后，皮质和海马区域的神经元结构明显得到强化，细胞边界和细胞核的清晰度提高，完整和健康的细胞数量显著增加。进一步证实了BYHWD在减轻缺血再灌注引起的脑损伤方面的有效性。

BYHWD对突触和神经元的影响

突触变化

透射电子显微镜观察结果显示，在假手术组中，皮质区域的神经元细胞核呈现规则的椭圆形轮廓，核膜保持完整。观察到的突触数量较多，形态各异且结构完整，与海马区域的情况相似。然而，MCAO大鼠模型大脑表现出显著的神经元损伤，包括细胞体肿胀、聚集、细胞膜收缩变形以及核膜的不完整性。突触数量明显减少，许多突触结构出现溶解现象，突触轮廓变得不清晰。

药物治疗后，受损的突触显示出明显的恢复迹象，神经元细胞损伤有所减轻，线粒体数量增多。细胞核和小泡变得清晰可见，突触结构相对完整，突触数量显著增加。突触后致密区的厚度显著增加，突触接触的曲率也明显增加（图3B-C）。各组大鼠海马区域突触的超微结构与皮质区域相似。BYHWD显著改善了海马区域突触的损伤，突触后致密区的厚度和突触界面的曲率显著增加（图3E-F）。

图3 BYHWD改善了大鼠皮质和海马区突触的超微结构（n=3）

树突和树突棘形态

Golgi染色法被应用于评估细胞体、树突及树突棘的形态变化（图4A-D）。结果显示，在20-60μm交点处的分布达到峰值，随后逐渐下降。分布图亦揭示，高剂量组的趋势与假手术组极为相似。相较于其他组别，模型组在各距离的交叉值均处于最低水平，这表明BYHWD具有改善树突形态的潜力（图4E-F）。Golgi-Cox染色揭示，脑缺血再灌注后，顶端与基底树突间的交叉点总数显著减少（图4G-H）。BYHWD（10g/kg和20g/kg）干预后，顶端与基底树突交叉的数量显著提升。此外，研究对V层神经元顶端与基底树突分支的总长度进行了测量（图4I-J）。模型组在脑缺血再灌注后，顶端与基底树突分支的总长度显著缩短。然而，BYHWD治疗组的顶端与基底树突分支的总长度显著增加。

同时，研究对每组前额叶皮层的第五层锥体神经元进行了探析。假手术组前额叶Ⅴ层锥体神经元的顶部与底部树突棘数量众多（图4K）。模型组树突棘数量较少，密度显著降低。与模型组相比，BYHWD低、中剂量组前额叶皮层Ⅴ层锥体神经元的顶端树突棘密度有所增加，基底树突棘密度未见显著变化。然而，大剂量BYHWD给药后，大鼠额叶皮层锥体神经元顶部与底部的树突棘密度显著增加。此外，神经元顶端与基底部分的成熟与未成熟树突棘密度亦显著增加（图4L-P）。

图4 BYHWD有效地增加了顶端和基部树突分支长度的总和

神经元凋亡

TUNEL技术被应用于检测神经元的凋亡情况（图5）。TUNEL阳性信号呈现为红色。在假手术组中，TUNEL阳性细胞数量有所减少，仅见少数细胞发生凋亡。相比之下，模型组的TUNEL阳性细胞数量显著上升。然而，在接受BYHWD治疗的组别中，TUNEL阳性神经元的数量明显减少，特别是在10g/kg和20g/kg剂量的BYHWD治疗下。

图5 BYHWD可减少大鼠缺血-再灌注后脑神经元的凋亡（n=3）