笹之雪的组织培养与快速繁殖&附培养基配方

笹之雪的组织培养与快速繁殖&附培养基配方

一、材料类别

茎尖和叶片

二、培养条件

诱导培养基：MS+BA2.0mg/L+NAA0.2 mg/L
增殖培养基：MS+BA0.5mg/L+NAA0.2 mg/L+KT1.0 mg/L
生根培养基：MS+ KT1.5mg/L+NAA0.5mg/L

所有培养基均附加30g/L的蔗糖和7g/L的琼脂，pH5.8。培养温度为(25±2)℃，除叶片诱导的前15d采用暗培养外，其他阶段均以日光灯为光源进行光照培养，每天连续光照1012h，光照强度为3040µmol·m-2·s-1。

三、材料与方法

以笹之雪的幼嫩侧芽为材料，自来水冲洗干净，饱和洗衣粉水浸泡 510min，流水冲洗1h，移到超净工作台上用75%的酒精消毒30s，无菌水冲洗12次，再用0.2%升汞消毒5min(滴加23滴吐温-80)，然后用无菌水冲洗45次，每次冲洗时间23min，无菌滤纸吸干水分。剥下材料外围的 23张叶片(每片叶平均分成叶顶、叶中、叶基三部分)和带有1 个小叶的茎尖。

四、炼苗与移栽

待试管苗长至23cm高、根长23cm时即可以炼苗。选取生长健壮的植株，室温下瓶内培养3d后打开瓶盖炼苗2~3d，小心地将试管苗从瓶中取出，用自来水洗净根部的培养基，移栽到已消毒过的泥碳土中。应注意遮荫， 控制好温湿度，成活率达 80%

本文原文来自ebio.com.cn