氨基氮含量测定方法详解

氨基氮含量测定方法详解

氨基氮是植物体内重要的氮代谢指标，其含量的准确测定对于理解植物生长和氮素循环具有重要意义。本文将详细介绍氨基氮的定义及其两种主要的测定方法：比色法和滴定法。

氨基氮是植物有机体代谢的产物，它以NH2的形式存在，是蛋白质分子的基本单位-氨基酸的组成部分。它是可能是植物体内合成的，或者是蛋白质分解后的产物。它是植物内氮代谢动态变化的指标之一。由于氨基酸和氨、酰胺、硝酸氮、亚硝酸氮均属于非蛋白质氮，测氨基氮的时候，要先将这些形态的氮去除，再对氨基氮含量测定。

测定氨基氮含量的方法，其实比较简单的，可以用比色法。不过，前处理的过程，需要认真完成。

蛋白质氮去除：将样品（如植物的茎叶）研磨成粉，烘干至恒重，用2%三氯乙酸浸泡，摇床振荡60min，过滤，滤液就是非蛋白质氮。

其他形态氮去除（仅供参考）：取上述滤液，以NaOH调整pH值，加入等量体积的饱和硼酸盐（pH10），蒸馏游离氨，用5-10mL2%硼酸吸收。蒸馏后，换上另外一个盛有硼酸的三角瓶，加5ml4%NaOH入样品中，将酰胺氮蒸馏到5-10ml2%硼酸中。蒸馏后，关闭蒸汽流。再换上新的硼酸三角瓶，加入0.2g代发达氏合金，再接到蒸发器上。慢慢通气，防止发生飞溅。

比色法

在pH 4.8的乙酸钠-乙酸缓冲液中，氨基氮与乙酰丙酮和甲醛反应生成黄色3,5-二乙酰-2,6-二甲基-1,4二氢化吡啶氨基酸衍生物。这种衍生物在波长400nm处有吸光度，通过制作标准曲线，与样品测定的吸光度值，可以计算氨基氮的含量。样品测定，可以进行适当的稀释，记录稀释倍数。同时，可以多测几次，求取平均值。

滴定法

检测原理：氨基氮能够和中性甲醛发生反应，生成羧酸，用NaOH可以滴定。

精密量取滤液2.50ml至250ml锥形瓶中,加入20ml蒸馏水,摇匀，加甲基红指示剂2-3滴，用0.1mol/l盐酸调至红色,放置3分钟，用0.03569mol/L氢氧化钠溶滴定液调至黄色。用定量加液器向锥形瓶内加入5.0ml中性甲醛，摇匀放置5分钟，再加入3滴酚酞指示剂，用标准氢氧化钠滴定至微红色即为终点，记录所消耗标准氢氧化钠溶液的体积。根据公式，可以计算出氨基氮的含量。