一次筛出 8 种癌？ 5 分钟搞懂「液体活检」是什么？怎么用？

一次筛出 8 种癌？ 5 分钟搞懂「液体活检」是什么？怎么用？

液体活检作为一种新兴的检测技术，在肺癌临床中的应用日趋成熟。它通过检测血液中的循环肿瘤DNA（ctDNA）、循环肿瘤细胞（CTC）和外泌体等，为癌症的早期筛查、诊断和治疗监测提供了新的可能。本文将为您详细解析液体活检的原理、优势及其在临床上的具体应用。

什么是液体活检？

液态活检通过取样脑脊液、唾液、胸水、血液、腹水、尿液等对疾病进行诊断，能在一定程度上避免组织异质性对肿瘤分子分型的影响。目前，基于血液的液态活检是最主要的研究方向，主要检测血液中游离的循环肿瘤 DNA（ctDNA）、循环肿瘤细胞（CTC）和外泌体（Exosome）。

液体活检的简要流程，图源：inivata.com

液体活检的理论依据是什么？

带有肿瘤组织基因突变信息的 ctDNA 由肿瘤细胞释放到血液中，液体活检能够检测到包含点突变（SNV）、短片段插入缺失（Indel）、融合基因（Fusion）、拷贝数变异（CNV）等各类基因突变信息。CTC 通常包含更多的信息，如更完整的转录组、蛋白表达等，可以为临床提供有用的信息。肿瘤来源的外泌体参与到肿瘤细胞与基底细胞的遗传信息的交换，从而导致大量新生血管的生成，促进了肿瘤的生长与侵袭，检测血液中的外泌体有助于了解更多肿瘤相关的信息。

液体活检有哪些优势？

相比于组织活检，液态活检技术主要有具有无创、可重复性强、可实现早期诊断、进行动态监测、克服肿瘤异质性等优势。

• 发现临床手段无法检测到的肿瘤组织：组织活检主要依赖于影像学检查，在肿瘤早期或术后无瘤期间，影像学上无占位效应。但血液或其他体液中却可能存在一些肿瘤相关信息，例如肿瘤细胞释放的 DNA 片段或外泌体等，通过液体活检可以实现肿瘤早期筛查以及术后的复发风险预测等。

• 液体活检的实时效应：液体活检标志物的半衰期很短，时效性较强。有研究表明 ctDNA 的半衰期仅不足 2 小时，这使得其可以精确反映肿瘤实时信息，达到指导用药、疗效和耐药监测等目的。有研究显示，液体活检的平均耗时为 9 天，组织活检为 15 天，这表明液体活检可以更早地为临床提供有效的信息。

• 实现动态监测：液体活检由于其灵活无创的特点，可重复性强，故可以实现对于复发、疗效或耐药的动态监测。影像学的提示往往会滞后，并且仅能显示肿瘤形态的变化，对于肿瘤内部如不同亚克隆间的消长无法分析，而且频繁的检测也有辐射带来的危害。

• 克服肿瘤异质性：由于肿瘤的异质性较强，不同个体的肿瘤、同一个体不同部位的肿瘤，同一部位的不同亚克隆组织，同一亚克隆的不同细胞，其中的遗传信息都可以是不尽相同的。传统的组织活检，是取病变组织的一部分做检测，存在局限性。液体活检取自全性循环 DNA 分子，理论上更全面，异质性偏差更低。如果结合组织活检和液体活检，则可进一步提高阳性率，使更多患者获益。

液体活检有哪些临床应用？

• 肿瘤基因检测：例如液体活检可以检测肺癌 9 项经典基因突变信息，即：EGFR、ERBB2、ALK、MET、ROS1、BRAF、RET、NTRK 以及 KRAS 突变。亦可以检测其他瘤种、其他基因位点突变信息。

• 指导癌症患者化疗：通过采集患者血液样本，使用液体活检技术，可以帮助医生团队更好地分析患者的状况，评估复发风险，将无需化疗的患者和有必要化疗的患者加以区分，避免无效化疗给患者带来的伤害。

• 评估治疗效果：在免疫治疗过程中，患者会存在小概率的「假进展」情况。借助液体活检技术，对患者用药后的体内微观变化进行分析评估，有利于帮助医生判断进展真假，避免错误的方案更迭。

• 癌症早期筛查：目前，常规癌症筛查中，主要针对的癌种有肺癌、乳腺癌、胃癌、结直肠癌等等。但一些特定癌种如胰腺癌、卵巢癌等，长期以来尚没有可靠的筛查方法，而液体活检或许能够弥补这个短板。

目前市面上主要有哪些液体活检技术？

液体活检技术主要包括数字 PCR（dPCR）、实时定量 PCR（qPCR）和二代测序（NGS）三种。其中，dPCR 通常用于单位点检测；qPCR 用于单基因多位点检测；NGS 则可同时检测大量基因的不同突变类型。

哪种液体活检方法更好？

• dPCR 的灵敏度较高，在血液检查中有一定优势，但一次检测位点相对较少。
• qPCR 是目前最为成熟的液态活检技术，可进行准确的定量检测，有定量范围宽、特异性强、操作简单快速等优势。
• NGS 技术获得信息更加全面，可获得 ctDNA 中各个基因的突变信息，有助于进一步避免肿瘤异质性问题，全面分析肿瘤突变情况，同时在用药监测、微小残留病（MRD）监测、肿瘤突变负荷（TMB）监测等方面为临床提供更多的决策依据。

不同类型检测技术各有优劣，临床医生可结合其特征灵活选择。