什么是免疫层析法?
什么是免疫层析法?
免疫层析(或横向流动免疫分析,LFIA)是一种快速、简便且流行的技术,用于识别血液、尿液和唾液等各种基质中的目标分子。该技术已被证明在医药、食品安全和环境健康等领域非常有用,因为它快速、易于操作且价格低廉。本文将详细讨论免疫层析法的工作原理、其用途以及该技术的优缺点。
免疫层析法的简要概述
免疫层析是一种诊断方法,利用抗体和抗原来确定给定样本中是否存在某些分子。这是一种纸基系统,样本通过毛细作用沿着纸条移动。当样本与试纸上的特定抗体相互作用时,就会发生反应,特别是形成一条可见的线。该技术应用于家庭妊娠测试、快速 COVID-19 测试和许多其他即时诊断。
免疫层析法如何工作?
免疫层析过程涉及几个关键组件:
侧流样品垫
样品垫是用来放置液体样品的垫子。该垫子有助于调节样品的流速,也可能含有有助于制备用于分析的样品的化学品。在某些测试中,可能需要将样品与缓冲溶液混合,以获得最佳的测试结果。
结合垫
结合垫上横向流动抗体与有色或荧光颗粒结合。这些抗体对目标分析物具有选择性。当样品通过结合垫时,这些目标分子会附着在这些标记的抗体上,形成复合物。
硝化纤维膜
硝酸纤维素膜是免疫层析试纸条最重要的组成部分。它有检测线和对照线。检测线上有针对目标分析物的特异性抗体,而对照线上有与标记抗体反应的抗体。当样品穿过膜时,目标分析物会与检测线上的抗体发生反应,形成可见信号。对照线通过与未与目标分析物结合的标记抗体的相互作用来评估测试。
吸水垫
吸水垫位于试纸末端的吸液管有助于通过膜抽出多余的流量,以保持恒定的流量。这有助于为试纸提供一个终点,从而帮助完成该过程。
免疫层析法的应用
免疫层析应用于生物、化学、医学等各个领域,由于其能够在后期环境中提供快速准确的结果,已成为许多领域必不可少的工具。
医学诊断
免疫层析已在许多领域得到应用,但最著名的应用可能是医学领域的诊断工具。家庭诊断工具最广泛的示例之一是家庭妊娠测试,可检测人绒毛膜促性腺激素(人绒毛膜促性腺激素)尿液中的免疫层析法还用于诊断疟疾、艾滋病毒、肝炎和 COVID 19 等感染。
食品安全
免疫色谱法用于食品安全,以识别对人体健康有害的病原体、毒素和过敏原。例如,它可以用于检查食品中的大肠杆菌或沙门氏菌,或食品中的花生或麸质。
环境监测
在环境分析中,免疫色谱法用于识别水和土壤中的农药、重金属和毒素等污染物。该应用对于预防环境风险和确保饮用水和食品中不含危险化学物质非常重要。
药物测试
免疫层析法最常见的应用是药物检测,其中尿液检测非法物质非常流行。它可以在现场快速给出结果,并且可以在犯罪现场或在雇用员工之前对其进行测试。
免疫层析法的优点
免疫层析法是一种非常流行的诊断技术,原因如下:
速度和便利:免疫层析法的第一个优点,或许也是最重要的优点是其效率。它在时间紧迫的情况下非常有用,因为可以在几分钟内获得结果。此外,测试非常容易进行,在大多数情况下甚至不需要使用复杂的仪器和知识。
成本效益:与 ELISA 等其他检测相比,免疫层析检测的制造成本并不高(酶联免疫吸附测定)这使得在资源匮乏、无法进行常规实验室检测的地区也能使用这种检测方法。
可移植性:这种测试方法体积小巧,便于运输,因此可用于野外站。例如,疟疾快速诊断测试通常应用于农村地区,因为农村地区缺乏或无法获得实验室服务。
免疫层析法的局限性
然而,与任何其他诊断技术一样,免疫层析法也存在某些缺点:
敏感性和特异性:免疫层析法在许多应用中很有用,但它的灵敏度(检测少量目标的能力)和特异性(区分目标与类似分子的能力)比实验室技术要差,例如ELISA或 PCR。还需要注意的是,可能存在假阳性和假阴性,尤其是在低浓度样本中。
定量限制:免疫层析测试大多是定量的,这意味着结果为“是或否”的形式(例如,目标分析物是否存在?)。
保质期有限:众所周知,免疫层析检测的保质期很短,尤其是在保存不当的情况下。试剂可能会受到水分或极端温度的影响,从而导致结果不准确。
结语
免疫层析也称为横向流动免疫测定法,由于其简单、快速和成本低廉,是诊断中最常用的诊断技术之一。该方法用于医学、食品卫生、环境诊断和药物分析等,其特点是在 POC 上快速准确地进行检测。虽然它可能不如在实验室中进行的传统方法那么敏感和具体,但一直在不断改进,例如纳米颗粒测试和将测试与智能手机集成。随着技术的进步,免疫色谱法将成为一种有价值的诊断技术,尤其是在需要快速和现场诊断的情况下。
常见问题
Q1:免疫层析法和ELISA有什么区别?
免疫层析和ELISA是两种使用抗体识别特定化合物的免疫测定方法。尽管如此,免疫色谱法效率更高、更简单,并且不需要任何特殊设备进行测试,因此非常适合即时检测。ELISA更敏感和具体,并且测试必须由实验室人员在实验室中进行。
问题2:免疫层析技术可以应用于新冠病毒的诊断吗?
免疫层析法用于检测 COVID-19。COVID-19 快速抗原检测使用免疫层析法,可检测鼻咽拭子或唾液中的病毒蛋白。这些检测可在短短 15 分钟内提供结果,非常适合筛查和即时检测。
问题 3:免疫层析检测作为识别 SARS-CoV-2 的手段有多有效?
免疫色谱法检测的灵敏度取决于检测的质量、所用样本和目标分析物。它们对于初步筛查特别有用,但可能会得到假阳性,如果目标分析物的浓度较低,也可能得到假阴性。可以进行的其他测试包括 PCR 或ELISA这些都是基于实验室的测试。