血清尿素测定的三种方法详解

血清尿素测定的三种方法详解

血清尿素测定是临床检验中常用的一种方法，主要用于评估肾功能。本文将介绍三种常用的血清尿素测定方法：二乙酰一肟法、脲酶-波氏比色法和酶偶联速率法。

二乙酰一肟法

二乙酰在强酸条件下与尿素缩合成红色的4,5-二甲基-2-氧咪唑化合物，颜色深浅与尿素含量成正比。因二乙酰不稳定，故由试剂中二乙酰一肟与强酸作用产生二乙酰。

脲酶-波氏比色法

脲酶水解尿素产生2分子氨和1分子二氧化碳，氨在碱性介质中与苯酚及次氯酸钠反应，生成蓝色的吲引哚酚阴离子，此过程需用亚硝基铁氰化钠催化反应。蓝色吲哚酚的生成量与尿素含量成正比，在630m波长处有吸收峰。

酶偶联速率法

尿素经脲酶催化水解生成2分子氨及1分子二氧化碳，在谷氨酸脱氢酶催化下，氨与α-酮戊二酸还原型辅酶Ⅰ作用生成谷氨酸与氧化型辅酶Ⅰ。还原型辅酶Ⅰ在340m波长处有吸收峰，其吸光度下降的速率与待测样品中尿素的含量成正比。