发酵罐无菌操作指南：从设备准备到发酵控制

发酵罐无菌操作指南：从设备准备到发酵控制

引用

网易

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https://www.163.com/dy/article/JNTP6IQ905382FCO.html

发酵罐的无菌操作是发酵过程中的关键环节，直接关系到发酵效率和产品质量。本文将详细介绍发酵罐无菌操作的具体步骤和注意事项，帮助读者更好地掌握相关技术要点。

设备准备与检查

在使用发酵罐前，需要进行全面的设备检查和清洁消毒工作。

• 检查设备完整性：全面检查罐体、阀门、管道、传感器等部件是否完好无损，确保所有连接处密封良好，无泄漏现象。
• 清洁消毒：发酵罐及其附属设备必须经过严格的清洁和消毒处理。使用合适的消毒剂进行清洗，并确保消毒剂残留完全去除。
• 工具准备：准备好清洁刷、清洁布、清洁海绵等清洁工具，以及清洁剂、消毒液等清洁用品。

灭菌操作

灭菌操作是确保发酵罐无菌环境的核心环节，主要包括发酵罐空消和培养基实消两个阶段。

发酵罐空消

发酵罐空消是将蒸汽直接通入罐内进行灭菌。具体操作如下：

• 空消时，应将罐上的接种口、排气阀及料路阀门微微打开，使蒸汽通过这些阀门排出，同时保持罐压为0.13～0.15MPa。
• 空消时间为30～40分钟，特殊情况下可采用间歇空消。
• 空消结束后，排掉罐内冷凝水。

培养基实消

培养基实消是在发酵罐空消后进行的进一步灭菌处理。具体操作如下：

• 空消结束后，将校正好的pH、DO电极装入罐体，加入配好的培养基。
• 实消时，利用夹套通蒸汽对培养基进行预热，待培养基温度到达90℃后，改为直接向罐内通入蒸汽。
• 当罐压升至0.12MPa，温度升到121℃～123℃时，保持罐压不变，30分钟后停止供汽。
• 打开冷却水的进排阀门，在夹套内通水冷却。

接种操作

接种操作是将菌种引入发酵罐的关键步骤，必须在严格无菌条件下进行。

• 接种准备：准备好铁挡板、打火机、酒精喷壶、接种圈、装95%乙醇的搪瓷缸容器、尖头钳子、活动扳手等工具。
• 接种过程：
• 移开接种口附近的胶管，将铁挡板围住接种口后用酒精喷壶朝接种口处喷酒精后点火。
• 将接种圈沾酒精点着后套住接种口处，用钳子拧开螺帽后迅速将菌种倒入发酵罐。
• 接种后迅速拧紧螺帽，整个过程确保无菌操作。

发酵过程控制

在发酵过程中，需要对各项参数进行严格监控和调节，以确保发酵过程的顺利进行。

• 参数设置：根据发酵工艺要求，设置合适的温度、pH值、搅拌速度、通气量等参数。
• 监控与调节：发酵启动后，密切监控各项参数，根据微生物生长情况和发酵进程，调节温度、通气量、搅拌速度等参数。
• 取样检测：在发酵中途取样检查时，需先用蒸汽灭菌取样管路阀门，防止杂菌污染。

设备维护与保养

发酵结束后，需要对发酵罐及相关设备进行彻底的清洗和保养，以确保下次使用的无菌环境。

• 清洗：发酵结束后，立即放水清洗发酵罐及料路管道阀门，并开动空压机，向发酵罐供气搅拌，将管路中的发酵液冲洗干净。
• 保养：设备停止使用时应清洗、吹干。过滤器的滤芯应取出清洗、凉干，妥善保管，法兰压紧螺母应松开，防止密封圈永久变形。

注意事项

为了确保发酵罐的无菌操作，需要注意以下几点：

• 人员培训：未经培训的人员，不得单独上岗操作。
• 无菌操作：接种和取样等操作必须在无菌环境下进行，避免杂菌污染。
• 环境控制：发酵车间应保持清洁、干燥、通风良好，水、汽不得直接泼到电器。

通过以上步骤，可以有效确保发酵罐的无菌操作，提高发酵效率和产品质量。