苏丹黑B染色:原理、方法及临床应用
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苏丹黑B染色:原理、方法及临床应用
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苏丹黑B染色是一种常用的医学检验技术,主要用于检测细胞内的脂类物质。该技术具有较高的灵敏度和特异性,广泛应用于各种血液疾病的诊断和鉴别。本文将详细介绍苏丹黑B染色的原理、实验方法、注意事项及临床意义。
苏丹黑B染色原理
苏丹黑B是一种脂溶性染料,可溶解于脂类中,使细胞内脂类着色而显示出来。对中性脂肪,尤其对磷脂的亲和力更具有特异性,不仅能显示大的脂肪滴,而且可显示微细结构中的隐性脂类。
苏丹黑B染色实验方法
- 干燥涂片浸于10%甲醛盐水中10min。
- 自来水冲洗10min,蒸馏水冲洗,晾干。
- 置入染液中,37℃染色1~12h。
- 置70%乙醇溶液中脱色3min,晾干。
- 用瑞氏染液复染20~30min。
注意事项
霍奇金病、恶性贫血、戈谢病可见阳性或弱阳性反应;再生障碍性贫血时,阳性增多。
参考范围
阳性产物为黑色或蓝黑色颗粒定位于胞浆中。
- 粒细胞除原粒细胞外,均可见阳性颗粒,嗜酸粒细胞呈泡状阳性;
- 单核细胞大多呈弱阳性反应,其颗粒细小,散在分布;
- 淋巴细胞、幼红细胞、巨核细胞和血小板呈阴性反应。
影响因素
- 苏丹黑B贮存液配好后,染料充分溶解后再用。
- 苏丹黑B贮存液为无水乙醇所配,易挥发,所以容器封闭性能要好,并置4℃冰箱保存。
- 苏丹黑B染色液可用1~2个月,如发生沉淀由蓝色变为褐色,则不宜再用。
- 缓冲液在临用前应混匀,对结果方能无影响。
- 避免部分脂肪溶解,涂片在染色前勿沾上丙酮、yi醚、氯仿等溶剂。
临床意义
SB染色与POX结果相似,但SB较POX更敏感。SB染色主要应用于各种急性白血病鉴别。
- 急性粒细胞白血病原粒细胞呈阴性反应,少数阳性;
- 早幼粒细胞呈阳性反应;
- 急性淋巴细胞白血病各期淋巴细胞均为阴性;
- 急性单核细胞白血病原单核细胞为阴性,少数为小而细小的阳性;
- 再生障碍贫血时成熟中性粒细胞的反应阳性程度增高;
- 慢性粒细胞白血病、霍奇金病、恶性贫血可见阳性减弱;
- 戈谢细胞呈弱阳性;
- 尼曼-匹克细胞呈中等阳性;
- 再生障碍性贫血时阳性增多。
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