Masson染色技术详解

Masson染色技术详解

Masson染色是一种经典的结缔组织染色方法，主要用于显示组织中的纤维和炎性因子。该方法通过不同分子量的染料渗透不同组织的特性，实现对胶原纤维、粘液、软骨等结构的特异性染色。本文将详细介绍Masson染色的原理、染料配制、具体步骤及染色结果。

原理

Masson染色的原理主要基于不同组织成分对光线的吸收差异以及不同染色剂与组织成分的化学反应。具体来说，该方法利用了一系列化学处理和不同染色剂的作用，使得胶原纤维产生色素沉淀，从而呈现出与周围组织不同的颜色。小分子量的染料容易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量的染料则只能进入结构疏松、渗透性高的组织。

染料配制

Masson染色常用的染料包括苏木精、丽春红（或酸性品红）、磷钼酸、苯胺蓝等。这些染料需要按照一定的比例进行配制，以获得最佳的染色效果。例如，Regaud氏苏木精的配制方法为：将苏木精1g加入蒸馏水80ml内加温溶解，冷却后加入95%酒精10ml和甘油10ml，放数日后即可应用。Masson丽春红酸性复红液的配制方法为：丽春红0.7g、酸性复红0.3g加入蒸馏水99ml和冰醋酸1ml。

染色步骤

Masson染色的步骤通常包括切片脱蜡至水、铬化处理（或去汞盐沉淀）、染色、分化、复染、脱水、透明和封固等过程。具体来说：

1. 将石蜡切片依次放入二甲苯、无水乙醇、90%乙醇等溶液中处理，以实现脱蜡至水。
2. 进行铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。
3. 用自来水和蒸馏水洗切片。
4. 用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5~10分钟。
5. 充分水洗，如过染可用盐酸酒精分化。
6. 用蒸馏水洗切片。
7. 用Masson丽春红酸性复红液染色5~10分钟。
8. 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
9. 用1%磷钼酸水溶液分化3~5分钟。
10. 不经水洗，直接用苯胺蓝或光绿液染色5分钟。
11. 以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
12. 用95%酒精、纯净酒精、二甲苯进行透明处理，最后用中性树胶封固。

染色结果

染色后，胶原纤维、粘液、软骨等通常呈蓝色（如使用光绿液染色则为绿色），胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质等呈红色，胞核呈黑蓝色。这样，通过颜色差异可以清晰地区分不同类型的纤维和组织成分。