实验室常见的核酸电泳缓冲液：TBE、TAE和MOPS缓冲液

实验室常见的核酸电泳缓冲液：TBE、TAE和MOPS缓冲液

核酸电泳是分子生物学研究中的一项基本技术，用于分离和分析DNA或RNA分子。TBE、TAE和MOPS缓冲液是核酸电泳中最常用的缓冲系统，它们各自具有独特的特性和应用场景。

核酸电泳缓冲液的作用与分类

TBE缓冲液：由Tris、硼酸和EDTA组成，具有较高的缓冲能力，适合于小分子DNA片段的分离。TBE的高缓冲能力有助于维持电泳过程中pH值的稳定，从而提高分辨率。

TAE缓冲液：与TBE相比，TAE的缓冲能力较弱，但其配制更为简便，成本较低。TAE适合于大分子DNA片段的电泳分析，以及需要进行后续酶促反应的实验。

MOPS缓冲液：MOPS是一种有机磺酸类化合物，具有良好的水溶性和稳定性。MOPS缓冲液在RNA电泳中的应用尤为重要，因为它能有效防止RNA的降解和变性，提高RNA分子的分离效果。

配制方法

TAE缓冲液

实验中经常将TAE配制成10× 或者 50× 的储液，实验前稀释储液到1×的工作液。

1x TAE 缓冲液的成分是：

• 40 mM Tris (pH 7.6)
• 20 mM acetic acid
• 1 mM EDTA

50x TAE储液配制方法：

• 将Tris(FW=121) 242g，100 ml 0.5 M EDTA， 57.1 ml的冰醋酸溶解在600 ml的去离子水中；
• 而后调节pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。
• 使用时稀释50倍 即为1×TAE Buffer。

TBE缓冲液

TBE缓冲液可以配置成 5× 或者 10×的储液。

1x TBE 缓冲液的成分是：

• 89 mM Tris (pH 7.6)
• 89 mM boric acid
• 2 mM EDTA

10x TBE 储液配制方法：

• 将Tris（FW=121）108g，硼酸（FW=61.8）55g，40 ml 0.5 M EDTA 溶解在600 ml的去离子水中；
• 而后调节pH至8.3，加去离子水定容至1L后，室温保存。
• 使用时稀释10倍 即为1×TBE Buffer。

MOPS缓冲液

10× MOPS缓冲液的成分是：

• 200 mM MOPS
• 20 mM NaOAc
• 10 mM EDTA

10× MOPS缓冲液储液配制方法：

• 41.8 g MOPS溶于DEP℃水；
• 用2 N NaOH调节至pH7.0，量取20mL1 M NaOAc(DEPC处理)，20 mL 0.5 M EDTA(pH8.0)(DEPC处理)；
• 加DEPC水定容至1L,0.45μm滤膜除杂，室温避光保存。