什么是TTC染色?TTC染色怎么做?
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什么是TTC染色?TTC染色怎么做?
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TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)染色是一种常用的生物实验技术,主要用于检测哺乳动物组织的缺血梗塞。该技术基于TTC与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色的原理,能够直观地显示组织的缺血情况。本文将详细介绍TTC染色的具体实验方法和步骤。
TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感复合物。它是呼吸链中吡啶-核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。所以TTC染色用来染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。
实验方法
染液配制:称取TTC粉末0.15g,放置在用锡箔纸包裹的带盖平皿里,吸取15ml的常温保存PBS溶解,放在4℃保存全程尽可能避光,染液需现配现用。(最好能配完染液立刻将脑片放入染色)
取脑:可麻醉后直接取脑或经生理盐水灌注后取脑。将脑子和刀片及镊子一并放置-20度冰箱中速冻10-20分钟,便于切片
切片:一般切成5-6片,每隔2mm切一片。第一刀在脑前极与视交叉连线中点处;第二刀在视交叉部位;第三刀在漏斗柄部位;第四刀在漏斗柄与后叶尾极之间。如果需计算面积的话,应切的均匀或用专门的脑槽。
染色:将切片置于TTC中,将装有TTC和脑片的平皿放在37℃烘箱内,保持5-10min翻动一次脑片,使染色均匀后拍照。
实验展示
本文原文来自搜狐
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