“谜之血型”：一例猫科动物中罕见的血型案例分享
“谜之血型”：一例猫科动物中罕见的血型案例分享
一只患有猫白血病病毒的家猫在输血治疗过程中被发现具有罕见的血型特征，类似于人类中极为罕见的孟买血型。这一发现不仅为兽医临床实践提供了重要参考，也为动物血型研究开辟了新的方向。
一只4.5岁的已绝育雄性家猫（短毛猫）因肾功能衰竭和逐渐加重的贫血被转诊至希腊Aristotle大学兽医学院伴侣动物诊所。该猫感染了猫白血病病毒（FeLV），需要进行输血治疗。在输血前的血型检测中，研究人员发现了一个令人惊讶的现象：这只猫的血型既不是常见的A型，也不是B型，而是表现出一种罕见的血型特征。
病例记录
该猫已有3周逐渐加重的厌食、嗜睡、口臭和呕吐病史。入院时的体格检查显示，该猫体况较差（评分2/5）、中度贫血、嗜睡、舌背部存在溃疡性病灶，以及左侧收缩期IV/VI级杂音。
全血细胞计数及血涂片检查显示为正色素性、红细胞性、非再生性贫血。网织红细胞为5400/μL（RI：<80 000/μL）；HCT为16%（RI：30%-45%）；伴有中性粒细胞增多29 400/μL（RI：3000-13 400/μL）和中度血小板减少症102 000/μL（RI：300 000-800 000/μL），血涂片上可见少量血小板聚集体。
血清生化检查显示肌酐浓度升高（6.1 mg/dL，RI：0.7-1.6 mg/dL）、尿素氮升高（117 mg/dL，RI：9-32 mg/dL）、无机磷升高（10.1 mg/dL，RI：3.5-6.7 mg/dL）。
尿液分析显示固定比重尿（1.012，入院前曾给予晶体液）、尿蛋白/肌酐比为1.8（RI：<0.4）、尿沉渣无活跃成分；尿培养未发现细菌。动脉血压正常。
腹部超声检查提示左肾皮质增厚，皮髓质交界模糊，右肾外观正常。因可能为严重的慢性肾病（基于国际肾脏病分级为IV期，伴蛋白尿），该猫被收治入院。
血型检测结果
使用免疫层析试纸条进行血型检测时，试纸条上未出现明确的A或B条带，仅对照条带清晰可见（图1）。重复使用同一ICS试纸条进行两次血型检测，包括一次用全血离心去除血浆后的浓缩红细胞进行测试，结果相同。
图1 使用免疫层析试纸对猫的全血（1、2）和经过血浆分离后浓缩的红细胞（3）进行院内血型检测。对照带清晰可见，但未见明显的A或B带。
此外，还进行了一次玻片反向血型检测，将两滴患者血清与一滴A型参考红细胞（BSA Animal Blood Bank, Porto, Portugal）混合后，观察到明显凝集（图2）。
图2 玻片血型检测：将2滴受血猫的血清与1滴A型参考红细胞混合后，可见明显的凝集现象。
进一步检测与分析
患猫接受了促红细胞生成素、等渗液体及其他支持治疗，但其临床状况和实验室指标恶化，导致主人在入院一个月后决定实施安乐死，未获得尸检许可。
由于血型检测结果异常，将两份剩余的EDTA抗凝血样送至ICS试纸条制造商进行进一步评估。更换不同批次的ICS试纸条后，仍无法检测出A或B型。
基于胶柱法交叉配血测试进行的主要和次要交叉配血显示，受血猫的血浆与来自两只A型和两只B型供血猫的红细胞样本均出现凝集（图3）。
图3 使用受血猫血浆与A型（2只猫）或B型（2只猫）红细胞进行主要交叉配血试验。在所有情况下均观察到类似的凝集模式。
使用两只A型和两只不同B型供血猫的红细胞与受血猫血浆进行抗A和抗B同种抗体效价测定，结果显示抗A效价最高达1/32稀释度，抗B效价最高达1/4稀释度（图4）。
图4 上半部分：使用交叉配血试验和受血猫血浆的连续稀释液对抗A同种抗体进行滴度测定，与2只A型猫的红细胞配血，稀释至1/32时仍显示阳性反应。下半部分：使用交叉配血试验和受血猫血浆的连续稀释液对抗B同种抗体进行滴度测定，与2只B型猫的红细胞配血，稀释至1/4时仍显示阳性反应。
当使用两只B型猫的血浆与受血猫红细胞进行交叉配血时，显示为阴性（相容）；而用一只A型猫血浆时也显示阴性（相容），但用另一只A型猫血浆时则显示阳性（不相容；图5）。
对4种CMAH基因变异进行基因分型分析（使用冷冻EDTA抗凝血样），结果显示其为单一纯合c.179G>T CMAH变异，预测为B型血。
图5 使用受血猫红细胞与A型猫血浆进行次要交叉配血试验，其中一只A型猫显示阳性（不兼容）反应（1），而另一只A型猫（2）及两只B型猫（3）的血浆均显示阴性（兼容）反应。
讨论
本文报告了一例在院内血型检测中未能检测出A或B抗原的猫。尽管基因检测证实该猫为bb基因型，携带导致土耳其家猫及其他品种呈现B型血的CMAH基因c.179G>T变异，但免疫层析试纸（ICS）多次检测及使用浓缩红细胞的测试未能识别其血型为A、B或C（AB），提示可能为“空白型”（即红细胞上既无NeuAc也无NeuGc）。
同时，该猫血浆中可检测到抗A（1/32）和抗B（1/4）同种抗体。这表明NeuAc可能未被吸收或合成，同时CMAH酶也发生突变，暗示CMAH可能已转变为一种不同于NeuAc或NeuGc的前体抗原。这些血型检测结果与一种不常见的“弱B型”或类似人类ABO血型系统中极其罕见的孟买型（Bombay型）有相似之处，尽管尚未在猫中鉴定出类似H抗原的前体底物。
在人类孟买血型中，由于红细胞缺乏形成A和B抗原所需的H抗原，即使ABO基因型不为O，ABO检测也会表现为O型。当其红细胞与抗A或抗B试剂匹配时，不会发生凝集，但此类个体会产生对A和B红细胞抗原以及H抗原的抗体，且需接受不含H抗原的血液。本例猫因技术限制，未能进行针对前体底物的测试。
人类ABO血型系统中少见的变异包括弱A和弱B亚型。这些亚型的红细胞上A或B抗原减少，与抗A或抗B抗体的凝集程度存在差异。一些弱B型可能与ABO基因CBF/NF-Y调控区的序列变异有关。12 少部分弱A或B亚型个体血浆中含有抗A或抗B抗体，类似于本病例中观察到的情况。
猫中基因型与表型的血型不一致较为罕见，但既往报道与本病例有所不同。10,11,14最近研究假设猫的红细胞上可能存在除ABC血型系统外的5种抗原，其中一种可能与此前描述的Mik抗原相对应。15,16一项猫研究中发现，4只患有FeLV相关贫血的A型家猫被误检测为AB型，即使在消除弱自身凝集后仍出现这一结果。这可能是B抗原在红细胞表面的抗原模拟或A型猫中NeuAc转化为NeuGc的CMAH活性下降所致。
本病例中的猫为FeLV阳性，尚不清楚这是否影响其抗原表达和同种抗体效价。一项多中心研究中未发现FeLV或FIV感染状态与血型分布的关联，也未观察到健康与患病猫之间血型分布的差异。19然而，该研究中FeLV抗原阳性猫的样本量较小（n=47），可能影响结果的有效性。
历史数据显示，本病例中使用的ICS试纸能可靠检测贫血及非贫血猫的ABC血型。一项研究显示，ICS试纸对A型和B型的诊断敏感性分别为97.7%和95.7%，特异性分别为100%和97.1%。另一项研究则发现其对所有血型的敏感性和特异性均为100%。但由于主人选择安乐死，本例无法采集更多新鲜血样，使用其他方法（如传统的金标准试管法、胶柱法、流式细胞术或小麦胚芽凝集素）重复检测。
综上所述，本例家猫的血型检测结果、反向血型检测、交叉配血结果及基因型分析与人类ABO血型系统中极罕见的孟买型类似，尽管猫中尚未发现类似H抗原的底物抗原。同时，也不能排除类似人类“弱B型”的可能性，其红细胞上的B抗原密度较低，导致常规血型检测方法无法识别。
本文原文来自宠物医师网