液相色谱仪操作流程是什么 液相色谱仪操作注意事项有哪些
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液相色谱仪是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物等领域的物质分离和鉴定。本文将详细介绍液相色谱仪的操作流程和注意事项,帮助使用者更好地掌握这一重要工具。
一、液相色谱仪操作流程是什么
生活中液相色谱仪并不常见,液相色谱仪是利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异,对混合物进行先分离,而后分析鉴定的仪器。那么液相色谱仪操作流程是什么呢?一起来看看吧!
首先先对流动相进行过滤,根据需要选择不同的滤膜,一般为有机系和水系,常用的孔径为0.20um和0.45um。然后对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。一般情况下,流动相冲洗20-30分钟后,仪器方可稳定,最重要的是仪器基线走后,方可进样测试。
二、液相色谱仪操作注意事项有哪些
- 流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质。
- 流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。
- 不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
- 使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然后用甲醇冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗。
- 长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相,因为纯水易长霉。
- 每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
- C18柱绝对不能进蛋白样品,血样、生物样品。
- 堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。
- 气泡会致使压力不稳,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
- 如果进液管内不进液体时,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相的清洗。
- 要注意柱子的pH值范围,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。
- 更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗,然后插入新的流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。
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