微量丙二醛(MDA)测试方法详解
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微量丙二醛(MDA)测试方法详解
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微量丙二醛(MDA)测试是一种常用的生物化学实验方法,用于检测生物样本中过氧化脂质的含量。该方法基于丙二醛(MDA)与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红色产物的原理,通过分光光度计在532nm波长下测定吸光度值,从而计算出样本中MDA的含量。本文将详细介绍该测试的原理、所需仪器耗材和试剂、试剂盒的组成与配制以及规范操作方法。
一、测试原理
过氧化脂质降解产物中的丙二醛(MDA)可与硫代巴比妥酸(TBA)缩合,形成红色产物,在532nm处有最大吸收峰。因底物为硫代巴比妥酸(Thibabituric Acid TBA),所以此法称TBA法。
二、测试所需仪器耗材和试剂
含532nm波长的分光光度计(上海美析仪器有限公司)及1cm光径比色皿(或酶标仪及96孔板)、95℃水浴锅、电炉(配试剂加热用)、台式低速离心机、各种规格移液器、双蒸水、无水乙醇、生理盐水(0.9%)或PBS(0.1M)、冰醋酸(分析纯,乙酸浓度≥99.5%)、涡旋混匀器、离心管、蛋白测定试剂(组织及细胞样本用)。
三、试剂盒组成与配制
注:试剂盒有效期1年。
四、规范操作方法
(此处省略具体操作步骤,如需了解完整内容,请参考原文)
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