农用微生物菌剂国家标准GB 20287-2006
农用微生物菌剂国家标准GB 20287-2006
农用微生物菌剂国家标准GB 20287-2006详细规定了农用微生物菌剂的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则、包装、标识、运输和贮存等内容。本标准适用于农用微生物菌剂类产品，对保障产品质量和规范市场具有重要意义。
前言
本标准的5.1、5.3和第8章条文为强制性条款，其余为推荐性条款。本标准的附录A、附录C和附录D为规范性附录，附录B为资料性附录。
农用微生物菌剂国家标准（GB 20287-2006）
1. 范围
本标准规定了农用微生物菌剂（即微生物接种剂）的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则、包装、标识、运输和贮存。本标准适用于农用微生物菌剂类产品。
2. 规范性引用文件
（略）
3. 术语和定义
（略）
4. 产品分类
产品按剂型可分为液体、粉剂、颗粒型；按内含的微生物种类或功能特性可分为根瘤菌菌剂、固氮菌菌剂、解磷类微生物菌剂、硅酸盐微生物菌剂、光合细菌菌剂、有机物料腐熟剂、促生菌剂、菌根菌剂、生物修复菌剂等。
5. 要求
5.1 菌种
生产用的微生物菌种应安全、有效。生产者应提供菌种的分类鉴定报告，包括属及种的学名、形态、生理生化特性及鉴定依据等完整资料。生产者应提供菌种安全性评价资料。采用生物工程菌，应具有允许大面积释放的生物安全性有关批文。
5.2 产品外观
（略）
5.3 产品技术指标
5.3.1 农用微生物菌剂产品的技术指标见表1，其中有机物料腐熟剂产品的技术指标按表2执行。
项目 | 指标 |
|---|---|
有效活菌数，亿/g（mL） | ≥ 0.2 |
杂菌率，% | ≤ 30 |
产品含水量，% | ≤ 30 |
产品细度（通过0.5mm筛孔），% | ≥ 80 |
保质期，个月 | ≥ 6 |
注：a复合菌剂，每一种有效菌的数量不得少于0.01亿/g(mL)；以单一的胶质芽胞杆菌（Bacillus mucilaginosus）制成的粉剂产品中有效活菌数不少于1.2亿/g。b此项仅在监督部门或仲裁双方认为有必要时检测。
表2 有机物料腐熟剂产品的技术指标
项目 | 指标 |
|---|---|
纤维素酶活，U/g | ≥ 100 |
蛋白酶活，U/g | ≥ 100 |
有效活菌数，亿/g（mL） | ≥ 0.2 |
杂菌率，% | ≤ 30 |
产品含水量，% | ≤ 30 |
产品细度（通过0.5mm筛孔），% | ≥ 80 |
保质期，个月 | ≥ 6 |
注：a以农作物秸秆类为腐熟对象测定纤维素酶活。b以畜禽粪便类为腐熟对象测定蛋白酶活。c此项仅在监督部门或仲裁双方认为有必要时检测。
5.3.2 农用微生物菌剂产品中无害化指标见表3。
参数 | 标准极限 |
|---|---|
粪大肠菌群数，个/g(mL) | ≤ 100 |
蛔虫卵死亡率，% | ≥ 95 |
砷及其化合物（以As计），mg/kg | ≤ 75 |
镉及其化合物（以Cd计），mg/kg | ≤ 10 |
铅及其化合物（以Pb计），mg/kg | ≤ 100 |
铬及其化合物（以Cr计），mg/kg | ≤ 150 |
汞及其化合物（以Hg计），mg/kg | ≤ 5 |
6. 试验方法
6.1 仪器设备
（略）
6.2 试剂
（略）
6.3 产品参数的检测
6.3.1 外观(感官)的测定
取少量样品放到白色搪瓷盘(或白色塑料调色板)中，仔细观察样品的颜色、形状、质地。
6.3.2 有效活菌数的测定
采用平板计数法，根据所测微生物的种类选用适宜的培养基。若采用最大可能数（Most Probable Number，MPN）5管法，遵照附录C的规定。
6.3.2.1 系列稀释
称取样品10 g（精确到0.01 g），加入带玻璃珠的100 mL的无菌水中(液体菌剂取l0.0 mL加入90 mL的无菌水中)，静置20 min，在旋转式摇床上200 r/min充分振荡30 min，即成母液菌悬液（基础液）。用无菌移液管分别吸取5.0mL上述母液菌悬液加入45 mL无菌水中，按1:10进行系列稀释，分别得到1:1×10 1，1:1×10 2，1:1×10 3，1:1×10 4……稀释的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。
6.3.2.2 加样及培养
每个样品取3个连续适宜的稀释度，用无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1 mL，加至预先制备好的固体培养基平板上，分别用无菌玻璃刮刀将不同稀释度的菌悬液均匀地涂于琼脂表面。每一稀释度重复3次，同时以无菌水作空白对照，于适宜的条件下培养。
6.3.2.3 菌落识别
根据所检测菌种的技术资料，每个稀释度取不同类型的代表菌落通过涂片、染色、镜检等技术手段确认有效菌。当空白对照培养皿出现菌落数时，检测结果无效，应重做。
6.3.2.4 菌落计数
以出现20300个菌落数的稀释度的平板为计数标准（丝状真菌为10150个菌落数），分别统计有效活菌数目和杂菌数目。当只有一个稀释度，其平均菌落数在20～300个之间时，则以该平均菌落数计算。若有两个稀释度，其平均菌落数均在20～300个之间时，应按两者菌落总数之比值决定。若其比值小于等于2应计算两者的平均数；若大于2则以稀释度小的菌落平均数计算。有效活菌数按式（1）或式（2）计算：
nm = Xkv1/(m0v2)×10 -8…………………（1）
nv = Xkv1/(v0v2)×10 -8…………………（2）
式中：
nm—质量有效活菌数，亿/g
nv—体积有效活菌数，亿/mL
X—菌落平均数，个
k—稀释倍数
v1—基础液体积，mL
v2—菌悬液加入量，mL
v0—样品量，mL
m0—样品量，g
6.3.3 霉菌杂菌数的测定
采用马丁培养基，测定方法同6.3.2。
6.3.4 杂菌率的测定
除样品有效菌外其它的菌均为杂菌。样品中杂菌率按式（3）计算：
m = n1/(n1+n)×100…………………（3）
式中：
m—样品杂菌率，%
n1