组培污染率太高的问题如何才能尽量避免？一款新型诺福组培杀菌剂

组培污染率太高的问题如何才能尽量避免？一款新型诺福组培杀菌剂

组培污染率高是植物组织培养中常见的问题，但通过以下措施可以尽量避免或降低污染率：

外植体的选择与处理

选择合适的外植体：

• 优先选择带菌少、表面积小的组织，如植物胚或茎尖。
• 避免在阴雨天采集外植体，因为高湿度会增加外植体的染菌概率。
• 避免选择多年生草本植物或生长在高温多雨环境中的植物。

外植体消毒：

• 根据不同植物和部位选择合适的消毒剂和时间。
• 对于内生菌，可采用超声波、热水浸泡、添加表面吸附剂（如吐温20）或在培养基中添加抗生素。
• 采用多种药剂交替浸泡法或多次灭菌法。

预处理：

• 对外植体进行低温或热水浴预处理，可降低污染率。
• 对欲取材的植株进行温室或无菌培养室预培养，并在培养液中添加抗生素。

培养基与器具的灭菌

培养基灭菌：

• 耐高温培养基需在121～123℃条件下灭菌20～30分钟。
• 避免使用已长菌的母液配制培养基。
• 灭菌后的培养基应放置3～5天后再使用。

器具灭菌：

• 接种用具需经过高温灭菌，每次使用后蘸酒精在酒精灯火焰上灼烧。
• 被污染的培养瓶和器皿要单独浸泡、清洗，有条件的可灭菌后再清洗。

环境控制

培养室与接种室：

• 接种室和培养室应合理设计，避免人员进出带入杂菌。
• 定期对培养室和接种室进行紫外线照射或药物熏蒸消毒。
• 夏秋季节增加排气扇换气次数，保持空气干燥。

超净工作台：

• 定期清洗和更换过滤器，防止操作区域带菌。

操作规范

无菌操作：

• 操作人员进入接种室前需更换白大褂和拖鞋，并定期清洗消毒。
• 接种过程中严格遵守无菌操作规程，避免人为污染。

反复检查：

• 对培养物进行反复检查，及时发现并处理污染。

消毒剂的选择

在植物组织培养室中，消毒剂的选择至关重要，既要确保消毒效果，又要避免对植物材料和环境造成负面影响。以下是几种常见的消毒剂及其特点和适用场景：

酒精

• 特点：酒精是最常用的表面消毒剂，70%-75%的酒精杀菌效果最好。它能够迅速杀灭大部分细菌和真菌，但浸泡时间过长会对植物材料造成损伤。
• 适用场景：常用于外植体的初步消毒，浸泡时间一般为30秒至1分钟。

升汞（氯化汞）

• 特点：升汞的消毒效果极佳，但具有毒性，使用后需用无菌水多次冲洗。对环境和人体危害较大，使用时需严格控制浓度和时间。
• 适用场景：适用于难以消毒的外植体，消毒时间一般为5-10分钟。

次氯酸钠

• 特点：次氯酸钠能够有效杀灭细菌、真菌和病毒，但消毒效果受浓度和时间影响较大。长期使用可能导致微生物产生抗性，且残留的氯元素会对外植体产生毒害作用。
• 适用场景：常用于外植体的消毒，浓度一般为0.5%-1%，消毒时间为10-15分钟。

过氧化氢

• 特点：过氧化氢消毒效果好，易清除，且不会损伤外植体。使用后分解为水和氧气，无残留。
• 适用场景：适用于叶片等外植体的消毒，浓度一般为10%-12%，消毒时间为5-15分钟。

新洁尔灭

• 特点：这是一种广谱表面活性消毒剂，对绝大多数植物外植体伤害较小，杀菌效果好。
• 适用场景：适用于多种外植体的消毒。

诺福（稳定性级过氧化氢和胶质银离子）

• 特点：诺福能够穿透和破坏微生物的细胞壁和细胞膜，有效杀灭多种微生物。消毒后无残留，不会阻碍植物细胞对营养物质的吸收，有利于外植体保持活力。诺福是一种高效、环保的消毒剂，杀菌率高达99.999%，能够广泛抑制和清除霉菌、细菌、真菌等。其作用后完全分解为水和氧气，无毒副产物产生，对植物和人体安全无害。
• 适用场景：适用于组培实验室的环境空间、设备工器具、外植体、培养基等环节的消毒。

选择建议

• 根据外植体类型选择：对于表面积小、带菌少的外植体，可选择酒精或次氯酸钠；对于难以消毒的外植体，可选择升汞或诺福。
• 考虑环保和安全性：优先选择环保、无毒的消毒剂，如奥克泰士和诺福，以减少对环境和人体的危害。
• 避免长期单一使用：为防止微生物产生抗性，建议交替使用不同类型的消毒剂。

通过合理选择和使用消毒剂，可以有效降低植物组织培养室的污染率，提高培养成功率。

降低组培污染率是一场需要耐心和细心的持久战，它涉及到组培过程的方方面面，从外植体的选择与消毒，到环境的优化、操作的规范以及设备的维护，每一个环节都不容小觑。我们要时刻保持警惕，不放过任何一个可能导致污染的细节。

我相信，只要大家在实践中不断尝试和改进这些方法，就一定能够有效地降低组培污染率，让组培实验更加顺利地进行。每一次成功地降低污染率，都是我们向科研目标迈进的坚实一步。让我们一起努力，战胜组培污染，为科研事业的发展贡献自己的力量！